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含内参的登革病毒与基孔肯雅病毒3重荧光定量PCR检测方法的建立与评估

摘要第3-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 前言第17-29页
    1.1 登革热、基孔肯雅热流行病学特征第17-22页
        1.1.1 登革热流行病学特征第18-20页
        1.1.2 基孔肯雅热流行病学特征第20-22页
    1.2 登革、基孔肯雅病毒病原学特征第22-23页
        1.2.1 登革病毒病原学特征第22-23页
        1.2.2 基孔肯雅病毒病原学特征第23页
    1.3 临床表现第23-25页
    1.4 虫媒病毒实验室检测方法第25-27页
    1.5 研究目的与意义第27-29页
第二章 登革病毒不同诊断方法评估第29-37页
    2.1 材料第29页
    2.2 主要试剂和仪器第29-30页
    2.3 方法第30-33页
        2.3.1 登革病毒NS1抗原免疫层析法检测第30页
        2.3.2 登革病毒NS1抗原酶联免疫法检测第30-32页
        2.3.3 登革病毒IgM/IgG抗体酶联免疫法检测第32页
        2.3.4 实时荧光定量PCR检测第32-33页
    2.4 结果第33-35页
        2.4.1 样本统计学描述第33页
        2.4.2 疾病不同时期几种检测方法阳性率的比较第33-34页
        2.4.3 统计分析第34-35页
    2.5 讨论第35-36页
    2.6 小结第36-37页
第三章 引物、探针设计及制备标准品第37-46页
    3.1 材料第37-39页
        3.1.1 病毒来源第37页
        3.1.2 试剂第37页
        3.1.3 主要溶液的配制第37-38页
        3.1.4 主要仪器设备第38-39页
    3.2 方法第39-43页
        3.2.1 引物和探针设计第39页
        3.2.2 标准品及内参的制备第39-43页
    3.3 结果第43-44页
        3.3.1 引物与探针序列第43页
        3.3.2 模板引物序列第43-44页
        3.3.3 登革和基孔肯雅病毒目的基因扩增电泳图第44页
        3.3.4 连接后单菌落培养第44页
        3.3.5 测序结果第44页
    3.4 结论第44-46页
第四章 灵敏度、特异度及临床样本的评估第46-54页
    4.1 材料第46页
        4.1.2 样本来源第46页
        4.1.3 试剂与设备第46页
    4.2 方法第46-49页
        4.2.1 提取病毒RNA第46-47页
        4.2.2 逆转录成cDNA第47页
        4.2.3 数字PCR检测拷贝数第47-48页
        4.2.4 临床样本评估第48-49页
    4.3 结果第49-52页
        4.3.1 标准曲线与检出限第49-50页
        4.3.2 重复性和特异度检测第50-51页
        4.3.3 临床样本评估第51-52页
    4.4 讨论第52-53页
    4.5 结论第53-54页
参考文献第54-59页
攻读学位期间发表论文第59-60页
致谢第60-62页

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