摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文略缩词 | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 赤霉素在植物生长中的作用 | 第11-17页 |
1.1.1 赤霉素简介 | 第11-12页 |
1.1.2 赤霉素的生物合成与代谢 | 第12-13页 |
1.1.3 赤霉素生物合成与代谢过程中的关键酶 | 第13-17页 |
1.2 GAox基因在药用植物中的研究进展 | 第17页 |
1.3 滇重楼的有性繁殖研究 | 第17-20页 |
1.4 本研究的意义 | 第20-21页 |
第二章 GAox基因的克隆、鉴定及生物信息学分析 | 第21-42页 |
2.1 材料、试剂和仪器 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-25页 |
2.2.1 转录组数据挖掘 | 第22页 |
2.2.2 种子处理 | 第22页 |
2.2.3 植物总RNA的提取及cDNA的合成 | 第22-23页 |
2.2.4 反转录合成cDNA的体系及程序 | 第23-24页 |
2.2.5 GAox基因的扩增、克隆及测序 | 第24-25页 |
2.2.6 序列分析 | 第25页 |
2.2.7 滇重楼GAox基因系统发育分析 | 第25页 |
2.2.8 滇重楼GAox蛋白的物理特性预测 | 第25页 |
2.2.9 滇重楼GAox基因蛋白质的结构域和同源建模分析 | 第25页 |
2.3 结果 | 第25-40页 |
2.3.1 转录组数据挖掘 | 第25-30页 |
2.3.2 总RNA提取及检测结果 | 第30页 |
2.3.3 cDNA第一链的合成结果 | 第30页 |
2.3.4 GAox基因的扩增、克隆及测序 | 第30-31页 |
2.3.5 序列分析 | 第31-32页 |
2.3.6 滇重楼GAox基因系统发育分析 | 第32-35页 |
2.3.7 滇重楼GAox蛋白的物理特性预测 | 第35页 |
2.3.8 滇重楼GAox蛋白结构域分析 | 第35-39页 |
2.3.9 滇重楼PpGA2ox1及PpGA2ox1蛋白三维结构建模 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-42页 |
第三章 GAox基因在种子萌发过程中的表达分析 | 第42-56页 |
3.1 材料、试剂和仪器 | 第42-43页 |
3.2 方法 | 第43-46页 |
3.2.1 实验材料处理 | 第43页 |
3.2.2 植物总RNA的提取 | 第43页 |
3.2.3 反转录合成cDNA的体系及程序 | 第43-44页 |
3.2.4 引物设计 | 第44页 |
3.2.5 内参基因的筛选 | 第44-45页 |
3.2.6 半定量PCR | 第45页 |
3.2.7 荧光定量PCR | 第45-46页 |
3.3 结果 | 第46-53页 |
3.3.1 种子及胚形态观察及萌发阶段划分 | 第46-47页 |
3.3.2 总RNA质量检测以及cDNA第一链合成 | 第47页 |
3.3.3 cDNA第一链的合成结果 | 第47页 |
3.3.4 内参基因的筛选 | 第47-48页 |
3.3.5 半定量PCR | 第48-49页 |
3.3.6 荧光定量PCR | 第49-53页 |
3.4 讨论 | 第53-56页 |
第四章 主要结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
附录一 | 第65-69页 |
附录二 | 第69-71页 |
附录三 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |