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红色荧光蛋白标记层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)遗传转化体系的建立

中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 引言第11-23页
    1.1 小麦根腐病及研究进展第11-14页
        1.1.1 小麦根腐病病原及层出镰孢菌研究进展第12-13页
        1.1.2 小麦根腐病的病害防治第13-14页
    1.2 荧光蛋白在植物病理研究中的应用第14-17页
        1.2.1 荧光蛋白的性质与结构第15-16页
        1.2.2 红色荧光蛋白与绿色荧光蛋白相较的优缺点第16-17页
    1.3 丝状真菌转化体系的建立第17-22页
        1.3.1 丝状真菌的遗传转化方法第17-20页
        1.3.2 丝状真菌转化载体的构建第20-21页
        1.3.3 用于丝状真菌遗传转化系统的选择标记第21-22页
            1.3.3.1 营养缺陷型标记第21页
            1.3.3.2 药物抗性标记第21页
            1.3.3.3 功能标记第21-22页
    1.4 本研究的目的及意义第22-23页
2 材料方法第23-36页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 供试菌株和质粒第23页
        2.1.2 实验中所用到的相关试剂、培养基及培养条件第23-24页
        2.1.3 仪器第24页
    2.2 实验方法第24-36页
        2.2.1 载体的构建第24-29页
        2.2.2 野生型F. proliferatum对潮霉素B的耐受实验及孢子萌发最适条件筛选第29-30页
        2.2.3 F. proliferatum的遗传转化第30页
        2.2.4 转化子总DNA的提取第30-31页
        2.2.5 转化子遗传稳定性分析第31-32页
        2.2.6 转化子在不同pH培养基上的生长第32页
        2.2.7 转化子胞外酶代谢检测分析第32-33页
        2.2.8 转DsRed基因的层出镰孢菌的侵染对小麦活性氧和保护酶类的影响第33-35页
        2.2.9 层出镰孢菌接种小麦后侵染过程的观察第35-36页
3 结果与分析第36-53页
    3.1 F. proliferatum的遗传转化、荧光表达及转化子的鉴定第36-42页
        3.1.1 载体的构建第36-37页
        3.1.2 野生型菌株对潮霉素B的耐受性实验及孢子萌发最适条件的筛选第37-39页
        3.1.3 层出镰孢菌F. proliferatum的遗传转化及转化子的获得第39-40页
        3.1.4 转化子的荧光显微镜观察及PCR鉴定第40-42页
    3.2 转化子的稳定性、生长特性分析及胞外酶代谢分析第42-47页
        3.2.1 转化子的稳定性分析第42-43页
        3.2.2 转化子生长特性分析第43-45页
        3.2.3 转化子胞外酶代谢分析第45-47页
    3.3 层出镰孢菌接种鲁麦21不同时间活性氧和保护酶类的变化第47-53页
        3.3.1 组织中H2O2活性分析第48页
        3.3.2 总超氧化物歧化酶(T-SOD)酶活性分析第48-50页
        3.3.3 过氧化氢(CAT)酶活性分析第50页
        3.3.4 过氧化物酶(POD)活性测定第50-51页
        3.3.5 丙二醛(MDA)的测定第51-53页
4 讨论第53-56页
    4.1 利用电击介导法将外源基因导入丝状真菌的遗传转化方法第53页
    4.2 转化子菌株Fp-RFP的鉴定及其与野生型菌株Fp-1 的比较第53页
    4.3 转化子菌株Fp-RFP和野生型菌株Fp-1 接种鲁麦21后组织中活性氧和保护酶类的研究第53-54页
    4.4 转化子菌株Fp-RFP侵染过程的观察第54-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-64页
致谢第64页

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