| 符号说明 | 第6-13页 |
| 中文摘要 | 第13-17页 |
| Abstract | 第17-21页 |
| 1 前言 | 第22-48页 |
| 1.1 禽白血病病毒（ALV）的研究进展 | 第22-28页 |
| 1.1.1 ALV的形态和理化特性 | 第22-23页 |
| 1.1.2 ALV的病毒基因组结构和蛋白组成 | 第23-25页 |
| 1.1.3 不同亚群的分类 | 第25页 |
| 1.1.4 内源性ALV和外源性ALV | 第25-26页 |
| 1.1.5 ALV的致病性 | 第26-27页 |
| 1.1.6 ALV-K的研究进展 | 第27-28页 |
| 1.2 ALV的流行病学和病毒传播方式 | 第28-39页 |
| 1.2.1 禽白血病在我国鸡群中的流行特点 | 第28-29页 |
| 1.2.2 禽白血病病毒的宿主范围 | 第29-30页 |
| 1.2.3 传播方式 | 第30-31页 |
| 1.2.4 ALV的遗传变异和重组 | 第31-32页 |
| 1.2.5 ALV血清抗体检测方法 | 第32-34页 |
| 1.2.6 ALV病原学检测方法 | 第34-36页 |
| 1.2.7 ALV的预防和控制 | 第36-39页 |
| 1.3 病毒准种的研究现状 | 第39-41页 |
| 1.3.1 病毒的准种概念与基本特性 | 第39-40页 |
| 1.3.2 测序技术与病毒准种的研究 | 第40页 |
| 1.3.3 动物病毒准种的研究进展 | 第40-41页 |
| 1.4 亚单位疫苗及免疫佐剂的概述 | 第41-46页 |
| 1.4.1 亚单位疫苗的研究进展 | 第41-43页 |
| 1.4.2 免疫佐剂的研究概况 | 第43-44页 |
| 1.4.3 CpG DNA的研究进展 | 第44-45页 |
| 1.4.4 松花粉多糖的研究进展 | 第45-46页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第46-48页 |
| 2 材料和方法 | 第48-72页 |
| 2.1 实验材料 | 第48-53页 |
| 2.1.1 毒株和细胞 | 第48页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第48页 |
| 2.1.3 主要分子生物学试剂及试剂盒 | 第48-49页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第49页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第49-51页 |
| 2.1.6 菌种和载体 | 第51-53页 |
| 2.2 常规试验操作方法 | 第53-60页 |
| 2.2.1 鸡胚成纤维细胞（CEF）的制备 | 第53页 |
| 2.2.2 间接免疫荧光（IFA）试验 | 第53-54页 |
| 2.2.3 ELISA试剂盒检测ALV抗原 | 第54页 |
| 2.2.4 ELISA试剂盒检测ALV抗体 | 第54-55页 |
| 2.2.5 细胞DNA的提取 | 第55页 |
| 2.2.6 病毒RNA的提取 | 第55-56页 |
| 2.2.7 PCR扩增 | 第56-57页 |
| 2.2.8 RT-PCR扩增 | 第57-58页 |
| 2.2.9 扩增产物的回收及纯化 | 第58页 |
| 2.2.10 PCR产物与T载体连接 | 第58页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第58-59页 |
| 2.2.12 连接产物的转化 | 第59页 |
| 2.2.13 重组克隆细菌的筛选 | 第59页 |
| 2.2.14 质粒的提取 | 第59-60页 |
| 2.2.15 质粒的酶切鉴定 | 第60页 |
| 2.2.16 阳性克隆的测序与序列分析 | 第60页 |
| 2.2.17 SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第60页 |
| 2.3 我国不同鸡群中禽白血病病毒的流行病学调查及其准种分析 | 第60-63页 |
| 2.3.1 病毒分离与鉴定 | 第60-61页 |
| 2.3.2 病毒RNA的提取 | 第61页 |
| 2.3.3 引物的设计与合成 | 第61页 |
| 2.3.4 RT-PCR扩增、克隆测序与序列分析 | 第61页 |
| 2.3.5 同一地方品系鸡群不同个体中ALV-J的准种多样性比较 | 第61-63页 |
| 2.4 公鸡精液对ALV传播作用的试验设计 | 第63-65页 |
| 2.4.1 病毒的扩增及定量 | 第63页 |
| 2.4.2 公鸡感染ALV-J实验设计 | 第63-64页 |
| 2.4.3 公鸡精液中ALV-J的分离及鉴定 | 第64页 |
| 2.4.4 授精母鸡ALV-J感染的测定 | 第64页 |
| 2.4.5 后代雏鸡ALV-J感染的测定 | 第64页 |
| 2.4.6 病毒RNA的提取，gp85基因扩增及其序列分析 | 第64-65页 |
| 2.5 不同佐剂及免疫增强剂对ALV-J gp85重组蛋白诱导抗体产生的研究 | 第65-66页 |
| 2.5.1 ALV-J gp85重组蛋白的表达，纯化 | 第65页 |
| 2.5.2 鸡群的免疫试验 | 第65页 |
| 2.5.3 母源抗体对雏鸡保护试验 | 第65-66页 |
| 2.5.4 雏鸡的病毒分离 | 第66页 |
| 2.6 K亚群ALV的生物学特性及其致病性研究 | 第66-68页 |
| 2.6.1 K亚群ALV的基因组分析 | 第66-67页 |
| 2.6.2 K亚群ALV的体外复制能力比较 | 第67页 |
| 2.6.3 K亚群ALV的致病性研究 | 第67-68页 |
| 2.7 env基因在ALV-K致病作用中的研究 | 第68-72页 |
| 2.7.1 K亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建和病毒拯救 | 第68-69页 |
| 2.7.2 env(J)-LTR(K) 和 env(K)-LTR(J)的嵌合感染性克隆的构建和病毒拯救（4 个） | 第69-71页 |
| 2.7.3 拯救病毒的体外复制动力学 | 第71页 |
| 2.7.4 拯救病毒的体内致病性实验设计 | 第71-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-99页 |
| 3.1 我国不同鸡群中禽白血病病毒的流行病学调查及其准种分析 | 第72-78页 |
| 3.1.1 我国不同鸡群中ALV的流行病学调查结果 | 第72-73页 |
| 3.1.2 同一地方品系鸡群不同个体中ALV-J的准种多样性比较 | 第73-78页 |
| 3.2 公鸡精液对ALV传播作用 | 第78-80页 |
| 3.2.1 公鸡精液中ALV-J的分离及鉴定结果 | 第78页 |
| 3.2.2 授精母鸡病毒血症、抗体反应及泄殖腔p27检测结果 | 第78-79页 |
| 3.2.3 授精母鸡产出种蛋中蛋清P27检测结果 | 第79页 |
| 3.2.4 后代雏鸡病毒血症及泄殖腔棉拭子 p27 检测结果 | 第79页 |
| 3.2.5 不同样品中ALV-J gp85基因的序列分析 | 第79-80页 |
| 3.3 不同佐剂及免疫增强剂对ALV-J gp85重组蛋白诱导抗体产生的研究 | 第80-86页 |
| 3.3.1 重组蛋白的表达和纯化 | 第80-81页 |
| 3.3.2 不同的佐剂和免疫增强剂对gp85重组蛋白诱导鸡体产生抗体的作用 | 第81-83页 |
| 3.3.3 种蛋中ALV-J卵黄抗体的检测 | 第83-84页 |
| 3.3.4 1日龄雏鸡母源抗体的检测 | 第84-85页 |
| 3.3.5 母源抗体对ALV-J的攻毒保护结果 | 第85-86页 |
| 3.4 K亚群ALV的全基因组分析及其致病性研究 | 第86-94页 |
| 3.4.1 K亚群ALV的全基因组分析 | 第86-90页 |
| 3.4.2 K亚群ALV的体外复制动态比较结果 | 第90页 |
| 3.4.3 K亚群ALV的致病性研究 | 第90-94页 |
| 3.5 env基因在ALV-K致病作用中的研究 | 第94-99页 |
| 3.5.1 K亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建和病毒拯救 | 第94-95页 |
| 3.5.2 env(J)-LTR(K) 和env(K)-LTR(J)的嵌合感染性克隆的拯救与鉴定 | 第95页 |
| 3.5.3 拯救病毒的体外复制动力学 | 第95-96页 |
| 3.5.4 拯救病毒的体内致病性研究 | 第96-99页 |
| 4 讨论 | 第99-108页 |
| 4.1 我国不同鸡群中 ALV 的流行病学调查及其准种分析 | 第99-100页 |
| 4.2 公鸡精液在 ALV 传播中的作用 | 第100-101页 |
| 4.3 不同佐剂及免疫增强剂对ALV-J gp85重组蛋白诱导抗体产生的研究 | 第101-103页 |
| 4.4 K亚群ALV的生物学特性及其对SPF鸡的致病性研究 | 第103-105页 |
| 4.5 env基因在ALV-K致病作用中的研究 | 第105-108页 |
| 5 结论 | 第108-109页 |
| 6 参考文献 | 第109-132页 |
| 7 致谢 | 第132-133页 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 | 第133-136页 |
