| 术语和缩略语表 | 第13-16页 |
| 摘要 | 第16-18页 |
| Abstract | 第18-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-45页 |
| 1.1 传统抗体在农药残留分析中的应用现状 | 第22-27页 |
| 1.1.1 多克隆抗体 | 第22-24页 |
| 1.1.2 单克隆抗体 | 第24-27页 |
| 1.2 基因工程抗体在农药残留分析中的应用 | 第27-41页 |
| 1.2.1 基因工程抗体的类型 | 第28-34页 |
| 1.2.2 基因工程抗体的表达 | 第34-36页 |
| 1.2.3 基因工程抗体的应用 | 第36-41页 |
| 1.3 抗体分子识别机制与结构改造研究进展 | 第41-43页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第43-45页 |
| 第二章 三唑磷和对硫磷单克隆抗体的制备 | 第45-62页 |
| 2.1 引言 | 第45-46页 |
| 2.2 材料与方法 | 第46-54页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第46-47页 |
| 2.2.2 仪器与设备 | 第47-48页 |
| 2.2.3 培养液及缓冲液配方 | 第48-49页 |
| 2.2.4 试验动物 | 第49页 |
| 2.2.5 人工抗原制备 | 第49-50页 |
| 2.2.6 动物免疫方案 | 第50页 |
| 2.2.7 杂交瘤细胞及单克隆抗体的制备 | 第50-53页 |
| 2.2.8 间接酶联免疫吸附法法建立 | 第53页 |
| 2.2.9 单克隆抗体性能评价 | 第53-54页 |
| 2.3 结果与分析 | 第54-59页 |
| 2.3.1 人工抗原制备 | 第54页 |
| 2.3.2 小鼠免疫应答效应 | 第54-56页 |
| 2.3.3 杂交瘤细胞阳性率测定 | 第56页 |
| 2.3.4 单克隆抗体性能评价 | 第56-59页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第59-62页 |
| 2.4.1 讨论 | 第59-60页 |
| 2.4.2 小结 | 第60-62页 |
| 第三章 三唑磷和对硫磷单链抗体分子的构建体系 | 第62-94页 |
| 3.1 引言 | 第62-63页 |
| 3.2 材料与方法 | 第63-76页 |
| 3.2.1 试剂与材料 | 第63-64页 |
| 3.2.2 仪器与设备 | 第64-65页 |
| 3.2.3 培养液及缓冲液配方 | 第65-67页 |
| 3.2.4 抗体可变区基因的克隆 | 第67-68页 |
| 3.2.5 单链抗体全长序列的扩增 | 第68-70页 |
| 3.2.6 原核表达体系的构建和表达 | 第70-71页 |
| 3.2.7 昆虫杆状病毒表达体系的构建和表达 | 第71-73页 |
| 3.2.8 毕赤酵母表达体系的构建和表达 | 第73-76页 |
| 3.2.9 可溶性单链抗体亲合性和特异性测定 | 第76页 |
| 3.3 结果与分析 | 第76-89页 |
| 3.3.1 V区序列扩增和分析 | 第76-78页 |
| 3.3.2 scFv全长序列的扩增 | 第78-79页 |
| 3.3.3 重组表达载体构建 | 第79-82页 |
| 3.3.4 HB2151大肠杆菌可溶表达 | 第82-84页 |
| 3.3.5 Sf9昆虫细胞可溶表达 | 第84-85页 |
| 3.3.6 GS115毕赤酵母可溶表达 | 第85-86页 |
| 3.3.7 可溶性scFv的抗体活性鉴定 | 第86-89页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第89-94页 |
| 3.4.1 讨论 | 第89-92页 |
| 3.4.2 小结 | 第92-94页 |
| 第四章 三唑磷和对硫磷双特异基因工程抗体的分子设计与表达 | 第94-115页 |
| 4.1 引言 | 第94-95页 |
| 4.2 材料与方法 | 第95-101页 |
| 4.2.1 试剂材料与仪器设备 | 第95页 |
| 4.2.2 培养液及缓冲液配方 | 第95页 |
| 4.2.3 VL-VH取向scFv的毕赤酵母表达体系构建 | 第95-96页 |
| 4.2.4 不同取向scFvs的大体积表达及差异分析 | 第96-97页 |
| 4.2.5 双价基因工程抗体的分子设计 | 第97-98页 |
| 4.2.6 双特异基因工程抗体的分子设计 | 第98-100页 |
| 4.2.7 PEG-taFv毕赤酵母表达体系的构建 | 第100页 |
| 4.2.8 不同构建方式taFvs的表达及活性分析 | 第100-101页 |
| 4.3 结果与分析 | 第101-111页 |
| 4.3.1 VL-VH取向scFv的毕赤酵母表达体系构建 | 第101-102页 |
| 4.3.2 不同取向scFv的抗体活性和产量差异 | 第102-104页 |
| 4.3.3 双价及双特异性taFvs的毕赤酵母表达体系构建 | 第104-105页 |
| 4.3.4 三唑磷双价taFvs的活性分析 | 第105-108页 |
| 4.3.5 三唑磷-对硫磷双特异性taFvs的活性分析 | 第108-111页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第111-115页 |
| 4.4.1 讨论 | 第111-113页 |
| 4.4.2 小结 | 第113-115页 |
| 第五章 三唑磷和对硫磷特异性基因工程抗体的识别机制初探 | 第115-132页 |
| 5.1 引言 | 第115-116页 |
| 5.2 材料与方法 | 第116-119页 |
| 5.2.1 氨基酸序列 | 第116-118页 |
| 5.2.2 软件及模块 | 第118页 |
| 5.2.3 同源建模及分子对接 | 第118页 |
| 5.2.4 单链抗体的亲合力动力学测定 | 第118-119页 |
| 5.3 结果与分析 | 第119-128页 |
| 5.3.1 抗三唑磷scFv的同源建模 | 第119-121页 |
| 5.3.2 scFv与三唑磷的识别机制 | 第121-123页 |
| 5.3.3 抗对硫磷scFv的同源建模 | 第123-125页 |
| 5.3.4 scFv与对硫磷的识别机制 | 第125-128页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第128-132页 |
| 5.4.1 讨论 | 第128-131页 |
| 5.4.2 小结 | 第131-132页 |
| 第六章 全文总结 | 第132-135页 |
| 6.1 全文总结 | 第132-133页 |
| 6.2 全文创新点 | 第133-134页 |
| 6.3 不足与展望 | 第134-135页 |
| 参考文献 | 第135-155页 |
| 作者简历 | 第155-156页 |
