| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 1 NCC体外抗柯萨奇病毒B3的研究 | 第17-24页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第17-18页 |
| 1.1.1 试验细胞 | 第17页 |
| 1.1.2 试验病毒 | 第17页 |
| 1.1.3 试验所用主要试剂和耗材 | 第17页 |
| 1.1.4 试验药物 | 第17页 |
| 1.1.5 试验试剂和仪器 | 第17-18页 |
| 1.2 溶液的配置 | 第18-19页 |
| 1.2.1 细胞培养所需溶液的配置方法 | 第18-19页 |
| 1.2.1.1 DMEM培养基 | 第18-19页 |
| 1.2.1.2 PBS缓冲液 | 第19页 |
| 1.2.1.3 胰酶消化液 | 第19页 |
| 1.2.1.4 NCC药物溶液的配制 | 第19页 |
| 1.3 试验方法 | 第19-22页 |
| 1.3.1 细胞的复苏、培养及传代 | 第19-20页 |
| 1.3.2 细胞的冻存 | 第20页 |
| 1.3.3 细胞计数 | 第20页 |
| 1.3.4 CVB3的扩增 | 第20页 |
| 1.3.5 CVB3滴度的测定 | 第20-21页 |
| 1.3.6 NCC细胞毒性测定 | 第21页 |
| 1.3.7 MTT法检测NCC抗CVB3活性 | 第21-22页 |
| 1.4 实验结果 | 第22页 |
| 1.4.1 TCID50的测定 | 第22页 |
| 1.4.2 MTT实验结果 | 第22页 |
| 1.5 讨论 | 第22-23页 |
| 小结 | 第23-24页 |
| 2 NCC对CVB3所致病毒性心肌炎作用机制的研究 | 第24-48页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.1 试验病毒 | 第24页 |
| 2.1.2 试验细胞 | 第24页 |
| 2.1.3 试验药物 | 第24页 |
| 2.1.4 试验试剂和耗材 | 第24-25页 |
| 2.1.5 试验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 试验所需溶液的配置 | 第26-27页 |
| 2.2.1 药物溶液的配置 | 第26页 |
| 2.2.2 细胞培养中所需溶液的配置 | 第26页 |
| 2.2.3 检查细胞线粒体膜电位中所需溶液的配置 | 第26页 |
| 2.2.3.1 JC-1 染色工作液 | 第26页 |
| 2.2.4 RT-PCR中溶液的配置 | 第26-27页 |
| 2.2.4.1 75%乙醇 | 第26-27页 |
| 2.2.5 Western Blot实验中所用溶液的配置 | 第27页 |
| 2.2.5.1 1×TAE电泳缓冲液 | 第27页 |
| 2.2.5.2 1%琼脂糖凝胶 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.3.1 细胞复苏、培养和冻存 | 第27页 |
| 2.3.2 线粒体膜电位 | 第27-28页 |
| 2.3.2.1 实验分组 | 第28页 |
| 2.3.2.2 实验步骤 | 第28页 |
| 2.3.3 RT-PCR法检测NCC抗CVB3的细胞因子表达的影响 | 第28-32页 |
| 2.3.3.1 试验材料的准备 | 第28-29页 |
| 2.3.3.2 总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.3.3.3 RNA样品质量的测定 | 第30页 |
| 2.3.3.4 引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| 2.3.3.5 cDNA的合成和RT-PCR | 第31-32页 |
| 2.3.3.6 RT-PCR | 第32页 |
| 2.3.4 Western Blot法检测NCC作用后CVB3感染Hela细胞的蛋白表达 | 第32-37页 |
| 2.3.4.1 提取细胞总蛋白 | 第33页 |
| 2.3.4.2 蛋白的浓度测定---BCA 法 | 第33-34页 |
| 2.3.4.3 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第34页 |
| 2.3.4.4 上样和电泳 | 第34-35页 |
| 2.3.4.5 转膜 | 第35页 |
| 2.3.4.6 考马斯亮蓝染胶与脱色 | 第35页 |
| 2.3.4.7 丽春红染色液染膜 | 第35页 |
| 2.3.4.8 封闭 | 第35页 |
| 2.3.4.9 孵一抗 | 第35-36页 |
| 2.3.4.10 孵二抗 | 第36页 |
| 2.3.4.11 ECL化学发光法显色 | 第36页 |
| 2.3.4.12 成像 | 第36页 |
| 2.3.4.13 清除一抗、二抗 | 第36页 |
| 2.3.4.14 封闭 | 第36-37页 |
| 2.3.4.15 孵一抗 | 第37页 |
| 2.3.4.16 孵二抗 | 第37页 |
| 2.3.4.17 成像 | 第37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-44页 |
| 2.4.1 线粒体膜电位结果 | 第37-39页 |
| 2.4.2 组织总RNA的提取的质量 | 第39页 |
| 2.4.3 RT-PCR检测结果 | 第39-42页 |
| 2.4.4 Western Blot实验结果 | 第42-44页 |
| 2.5 讨论 | 第44-47页 |
| 2.6 小结 | 第47-48页 |
| 3 全文结论 | 第48-49页 |
| 4 本研究的创新点 | 第49-50页 |
| 5 展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 综述 | 第55-72页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 个人简介 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
