| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| 1 烟碱 | 第8-11页 |
| 1.1 烟碱的物理化学性质 | 第8-9页 |
| 1.2 烟碱的功效和危害 | 第9-11页 |
| 1.2.1 烟碱的功效 | 第9-10页 |
| 1.2.2 烟碱的危害 | 第10-11页 |
| 2 应用生物技术降解烟碱的必要性 | 第11-13页 |
| 3 国内外微生物降解烟碱的研究动态 | 第13-15页 |
| 3.1 降解烟碱的微生物种类 | 第13-14页 |
| 3.2 微生物降解烟碱的三大代谢途径 | 第14-15页 |
| 3.3 微生物降解烟碱的关键酶 | 第15页 |
| 4 原生质体融合技术的简介 | 第15-16页 |
| 5. 双向电泳的简介 | 第16-18页 |
| 5.1 双向电泳的原理 | 第16-18页 |
| 5.2 2-DE技术在细菌蛋白质组学中的应用 | 第18页 |
| 6 本课题研究意义 | 第18-19页 |
| 7 本文研究的主要内容 | 第19-20页 |
| 第二章 原生质体融合选育高效降解烟碱菌株 | 第20-32页 |
| 1 材料与方法 | 第21-24页 |
| 1.1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1.1 降烟碱细菌 | 第21页 |
| 1.1.2 试剂及培养基 | 第21-22页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
| 1.2 方法 | 第22-24页 |
| 1.2.1 烟碱含量的测定 | 第22页 |
| 1.2.2 制备解淀粉芽孢杆菌T11原生质体 | 第22-23页 |
| 1.2.3 制备边缘假单胞菌的原生质体 | 第23页 |
| 1.2.4 热力灭活单亲边缘假单胞菌的原生质体 | 第23页 |
| 1.2.5 PEG-6000诱导原生质体融合及融合子的再生、筛选 | 第23-24页 |
| 1.2.6 融合子降烟碱能力的遗传稳定性 | 第24页 |
| 1.2.7 融合子与亲株间降烟碱能力的比较 | 第24页 |
| 1.3 数据处理 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.1 烟碱标准曲线 | 第24-25页 |
| 2.2 解淀粉芽孢杆菌T11与边缘假单胞菌的生长曲线 | 第25-26页 |
| 2.3 解淀粉芽孢杆菌T11和边缘假单胞菌原生质体图 | 第26-27页 |
| 2.4 酶解破壁时间对原生质体形成率和再生率的影响 | 第27页 |
| 2.5 边缘假单胞菌原生质体热灭活对灭活率的影响 | 第27-28页 |
| 2.6 PEG-6000促融时间对融合率的影响 | 第28页 |
| 2.7 融合子遗传稳定性的检测 | 第28-29页 |
| 2.8 融合子A2与亲株降烟碱能力的对比 | 第29-30页 |
| 3 结论与讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 降烟碱酶学性质和菌株胞内蛋白质组学的研究 | 第32-49页 |
| 1 材料与方法 | 第32-40页 |
| 1.1 材料与设备 | 第32-35页 |
| 1.1.1 菌株 | 第32页 |
| 1.1.2 主要药品和试剂 | 第32-34页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 1.2 方法 | 第35-40页 |
| 1.2.1 分离纯化融合子烟碱降解酶的方法 | 第35-37页 |
| 1.2.2 烟碱降解酶的基本性质 | 第37-38页 |
| 1.2.3 菌株胞内蛋白的提取及双向电泳 | 第38-40页 |
| 1.2.4 烟碱代谢物的检测 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-48页 |
| 2.1 烟碱降解酶含量测定的标准曲线 | 第40-41页 |
| 2.2 烟碱降解酶液的(NH_4)_2SO_4分级沉淀 | 第41-42页 |
| 2.3 烟碱降解酶液的葡聚糖凝胶层析 | 第42-43页 |
| 2.4 烟碱降解酶的纯度和分子量 | 第43页 |
| 2.5 烟碱降解酶的酶学性质研究 | 第43-45页 |
| 2.6 融合子菌株胞内蛋白分离的重复性 | 第45-46页 |
| 2.7 烟碱诱导下融合子菌株胞内蛋白图谱分析 | 第46-48页 |
| 3 结论 | 第48-49页 |
| 第四章 大田降烟碱实验 | 第49-62页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 1.1 菌株 | 第49页 |
| 1.2 菌株的田间降烟碱试验安排 | 第49-50页 |
| 1.3 取样 | 第50页 |
| 1.4 样品烟碱含量的测定 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-60页 |
| 2.1 烟碱含量的变化 | 第51-55页 |
| 2.1.1 菌液处理烟叶1次烟碱含量变化情况 | 第51-52页 |
| 2.1.2 菌液间隔处理烟叶2次烟碱含量变化情况 | 第52-53页 |
| 2.1.3 菌液间隔处理烟叶3次烟碱含量变化情况 | 第53-54页 |
| 2.1.4 菌液连续处理烟叶4次烟碱含量变化情况 | 第54-55页 |
| 2.1.5 菌液根灌处理烟株后烟碱含量变化情况 | 第55页 |
| 2.2 GFP示踪试验 | 第55-58页 |
| 2.3 烟叶品质分析 | 第58-60页 |
| 3 结论与讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 结论与展望 | 第62-63页 |
| 1 全文主要结论 | 第62页 |
| 2 本研究的主要创新点 | 第62页 |
| 3 本研究的不足之处 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71页 |
