| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1 植物休眠机制研究综述 | 第11-13页 |
| 1.1 生物学水平研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 分子水平研究进展 | 第12页 |
| 1.3 MADS-box转录因子研究进展 | 第12-13页 |
| 2 植物相关抗寒性研究 | 第13-23页 |
| 2.1 抗寒指标 | 第13-14页 |
| 2.2 植物抗寒基因工程研究进展 | 第14-22页 |
| 2.2.1 渗透调节相关基因 | 第14-16页 |
| 2.2.2 脂肪酸去饱和酶相关基因 | 第16-18页 |
| 2.2.3 抗氧化酶活性基因 | 第18-20页 |
| 2.2.4 抗冻蛋白基因 | 第20-22页 |
| 2.3 茶树抗寒基因研究进展 | 第22-23页 |
| 3 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 4 技术路线图 | 第24-25页 |
| 第二章 茶树CsDAM2基因过表达载体构建 | 第25-34页 |
| 1 材料与仪器 | 第25-26页 |
| 1.1 菌种及质粒 | 第25页 |
| 1.2 植物材料 | 第25页 |
| 1.3 试剂 | 第25页 |
| 1.4 抗生素及激素 | 第25-26页 |
| 1.5 培养基 | 第26页 |
| 1.6 引物 | 第26页 |
| 1.7 主要仪器 | 第26页 |
| 2 试验方法 | 第26-30页 |
| 2.1 总RNA的提取、纯化及检测 | 第26页 |
| 2.2 cDNA第一链合成 | 第26页 |
| 2.3 CsDAM2基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.4 CsDAM2基因片段切胶回收 | 第27-28页 |
| 2.5 CsDAM2基因的回收产物加A尾 | 第28页 |
| 2.6 pCXSN载体酶切及片段回收 | 第28页 |
| 2.7 CsDAM2过表达载体构建 | 第28-30页 |
| 2.7.1 连接反应 | 第28-29页 |
| 2.7.2 大肠杆菌感受态DH5a制备 | 第29页 |
| 2.7.3 转化大肠杆菌DH5a及转化子验证 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-32页 |
| 3.1 茶树总RNA的检测及分析 | 第30-31页 |
| 3.2 CsDAM2基因PCR扩增 | 第31页 |
| 3.3 载体pCXSN质粒酶切 | 第31页 |
| 3.4 热激法转化大肠杆菌DH5a转化子验证 | 第31-32页 |
| 4 小结 | 第32页 |
| 5 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 农杆菌GV3101介导CsDAM2表达载体转化烟草 | 第34-43页 |
| 1 材料与仪器 | 第34-35页 |
| 1.1 菌种 | 第34页 |
| 1.2 植物材料 | 第34页 |
| 1.3 试剂 | 第34页 |
| 1.4 抗生素及激素 | 第34页 |
| 1.5 培养基 | 第34-35页 |
| 1.6 主要仪器 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-38页 |
| 2.1 热激法转化农杆菌GV3101及转化子的鉴定 | 第35页 |
| 2.2 农杆菌GV3101介导CsDAM2表达载体转化烟草 | 第35-37页 |
| 2.2.1 烟草材料的准备 | 第35-36页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌的培养 | 第36页 |
| 2.2.3 转化烟草及烟草植株再生 | 第36-37页 |
| 2.3 转基因烟草植株分子生物学检测 | 第37-38页 |
| 2.3.1 转pCXSN-CsDAM2的PCR检测 | 第37页 |
| 2.3.2 电导率的测定 | 第37-38页 |
| 2.3.3 叶绿素荧光值测定 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.1 重组质粒pCXSN-CsDAM2转农杆菌GV3101转化子验证 | 第38页 |
| 3.2 农杆菌介导的遗传转化及植株再生 | 第38-40页 |
| 3.3 阳性烟草植株PCR检测 | 第40页 |
| 3.4 阳性烟草植株相对电导率及叶绿素荧光值测定测定 | 第40-41页 |
| 4 小结 | 第41-42页 |
| 5 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 全文总结 | 第43-45页 |
| 1 主要研究成果 | 第43页 |
| 2 创新点 | 第43-44页 |
| 3 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
