摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
英文缩略词与英汉对照 | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-27页 |
1.1 转基因作物的发展状况 | 第11-15页 |
1.1.1 全球转基因作物产业发展状况 | 第11-13页 |
1.1.2 我国转基因作物产业发展 | 第13-15页 |
1.2 转基因生物和产品的监管 | 第15-16页 |
1.2.1 国外转基因生物及产品的监督管理概况 | 第15-16页 |
1.2.2 我国转基因生物及产品监督管理概况 | 第16页 |
1.3 国内外转基因检测技术的研究应用概况 | 第16-22页 |
1.3.1 蛋白质水平的检测方法 | 第17-18页 |
1.3.1.1 ELISA检测技术 | 第17页 |
1.3.1.2 试纸条检测技术 | 第17-18页 |
1.3.2 核酸水平检测方法 | 第18-22页 |
1.3.2.1 定性PCR | 第18-20页 |
1.3.2.2 定量PCR | 第20-21页 |
1.3.2.3 基因芯片 | 第21-22页 |
1.4 转基因标准物质的研发和应用概况 | 第22-24页 |
1.5 转基因木瓜的发展概况 | 第24-25页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
第二章 阳性质粒分子的构建与分析 | 第27-37页 |
2.1 材料与试剂 | 第27-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第27页 |
2.1.3 主要药品和试剂 | 第27页 |
2.1.4 载体与菌株 | 第27-28页 |
2.1.5 PCR扩增引物与扩增条件 | 第28-29页 |
2.1.6 主要溶液和试剂配方 | 第29页 |
2.2 方法 | 第29-33页 |
2.2.1 基因序列收集与分析方法 | 第29页 |
2.2.2 植物基因组DNA提取与定量 | 第29页 |
2.2.3 特异性阳性质粒分子的的构建 | 第29-33页 |
2.2.3.1 目的基因序列信息的收集和分析 | 第29-30页 |
2.2.3.2 阳性质粒标准分子的构建方案 | 第30页 |
2.2.3.3 重叠PCR扩增融合基因片段 | 第30页 |
2.2.3.4 目的片段的回收 | 第30-31页 |
2.2.3.5 目的片段与载体连接 | 第31-32页 |
2.2.3.6 连接产物的转化 | 第32页 |
2.2.3.7 重组质粒的提取与纯化 | 第32页 |
2.2.3.8 重组质粒的鉴定与保存 | 第32-33页 |
2.2.4 标准质粒分子的性质分析 | 第33页 |
2.2.4.1 特异性检验 | 第33页 |
2.2.4.2 可替代性分析 | 第33页 |
2.2.4.3 灵敏度检验 | 第33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-36页 |
2.3.1 酶切鉴定 | 第33-34页 |
2.3.2 PCR鉴定 | 第34页 |
2.3.3 特异性检验 | 第34-35页 |
2.3.4 可替代性检验 | 第35页 |
2.3.5 定性PCR灵敏度检验 | 第35-36页 |
2.4 小结 | 第36-37页 |
第三章 阳性质粒分子在转基因番木瓜检测中的应用 | 第37-42页 |
3.1 材料 | 第37页 |
3.1.1 实验材料 | 第37页 |
3.1.2 试验仪器 | 第37页 |
3.1.3 主要试剂与配方 | 第37页 |
3.2 方法 | 第37-39页 |
3.2.1 番木瓜基因组DNA的提取与纯化 | 第37-38页 |
3.2.2 番木瓜DNA的质量分析与PCR产物凝胶电泳 | 第38页 |
3.2.3 待测样品转基因成分PCR检测 | 第38页 |
3.2.4 阳性样品的事件特异性检测 | 第38-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-41页 |
3.3.1 样品基因组DNA的电泳和紫外分光光度计检测 | 第39页 |
3.3.2 番木瓜样品的转基因成分筛选检测 | 第39-41页 |
3.3.3 转基因番木瓜样品事件特异性检测 | 第41页 |
3.4 小结 | 第41-42页 |
第四章 结论与展望 | 第42-44页 |
4.1 结论 | 第42页 |
4.2 讨论与展望 | 第42-44页 |
4.2.1 讨论 | 第42-43页 |
4.2.2 展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第49-50页 |
附录 | 第50-53页 |
附表 | 第53-54页 |