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转基因番木瓜检测用阳性标准分子的构建与应用

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
英文缩略词与英汉对照第6-11页
第一章 前言第11-27页
    1.1 转基因作物的发展状况第11-15页
        1.1.1 全球转基因作物产业发展状况第11-13页
        1.1.2 我国转基因作物产业发展第13-15页
    1.2 转基因生物和产品的监管第15-16页
        1.2.1 国外转基因生物及产品的监督管理概况第15-16页
        1.2.2 我国转基因生物及产品监督管理概况第16页
    1.3 国内外转基因检测技术的研究应用概况第16-22页
        1.3.1 蛋白质水平的检测方法第17-18页
            1.3.1.1 ELISA检测技术第17页
            1.3.1.2 试纸条检测技术第17-18页
        1.3.2 核酸水平检测方法第18-22页
            1.3.2.1 定性PCR第18-20页
            1.3.2.2 定量PCR第20-21页
            1.3.2.3 基因芯片第21-22页
    1.4 转基因标准物质的研发和应用概况第22-24页
    1.5 转基因木瓜的发展概况第24-25页
    1.6 本研究的目的和意义第25-27页
第二章 阳性质粒分子的构建与分析第27-37页
    2.1 材料与试剂第27-29页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 主要仪器设备第27页
        2.1.3 主要药品和试剂第27页
        2.1.4 载体与菌株第27-28页
        2.1.5 PCR扩增引物与扩增条件第28-29页
        2.1.6 主要溶液和试剂配方第29页
    2.2 方法第29-33页
        2.2.1 基因序列收集与分析方法第29页
        2.2.2 植物基因组DNA提取与定量第29页
        2.2.3 特异性阳性质粒分子的的构建第29-33页
            2.2.3.1 目的基因序列信息的收集和分析第29-30页
            2.2.3.2 阳性质粒标准分子的构建方案第30页
            2.2.3.3 重叠PCR扩增融合基因片段第30页
            2.2.3.4 目的片段的回收第30-31页
            2.2.3.5 目的片段与载体连接第31-32页
            2.2.3.6 连接产物的转化第32页
            2.2.3.7 重组质粒的提取与纯化第32页
            2.2.3.8 重组质粒的鉴定与保存第32-33页
        2.2.4 标准质粒分子的性质分析第33页
            2.2.4.1 特异性检验第33页
            2.2.4.2 可替代性分析第33页
            2.2.4.3 灵敏度检验第33页
    2.3 结果与分析第33-36页
        2.3.1 酶切鉴定第33-34页
        2.3.2 PCR鉴定第34页
        2.3.3 特异性检验第34-35页
        2.3.4 可替代性检验第35页
        2.3.5 定性PCR灵敏度检验第35-36页
    2.4 小结第36-37页
第三章 阳性质粒分子在转基因番木瓜检测中的应用第37-42页
    3.1 材料第37页
        3.1.1 实验材料第37页
        3.1.2 试验仪器第37页
        3.1.3 主要试剂与配方第37页
    3.2 方法第37-39页
        3.2.1 番木瓜基因组DNA的提取与纯化第37-38页
        3.2.2 番木瓜DNA的质量分析与PCR产物凝胶电泳第38页
        3.2.3 待测样品转基因成分PCR检测第38页
        3.2.4 阳性样品的事件特异性检测第38-39页
    3.3 结果与分析第39-41页
        3.3.1 样品基因组DNA的电泳和紫外分光光度计检测第39页
        3.3.2 番木瓜样品的转基因成分筛选检测第39-41页
        3.3.3 转基因番木瓜样品事件特异性检测第41页
    3.4 小结第41-42页
第四章 结论与展望第42-44页
    4.1 结论第42页
    4.2 讨论与展望第42-44页
        4.2.1 讨论第42-43页
        4.2.2 展望第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-49页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第49-50页
附录第50-53页
附表第53-54页

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