黑麦氢离子焦磷酸化酶(ScHP1)基因的克隆与表达分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-18页 |
| ·逆境对植物生长的影响 | 第11-14页 |
| ·植物耐贫瘠的研究 | 第11-12页 |
| ·植物低温胁迫的研究 | 第12-13页 |
| ·植物干旱胁迫的研究 | 第13页 |
| ·植物高盐胁迫的研究 | 第13-14页 |
| ·黑麦的特性 | 第14页 |
| ·氢离子焦磷酸化酶基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR技术原理及方法 | 第15-17页 |
| ·实时荧光定量PCR原理 | 第15-16页 |
| ·实时荧光定量PCR技术种类 | 第16页 |
| ·实时荧光定量PCR定量方法 | 第16-17页 |
| ·立题依据 | 第17-18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-38页 |
| ·供试材料 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-38页 |
| ·小麦及其近缘属耐低钾材料的筛选 | 第18-19页 |
| ·秦岭黑麦RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·5’RACE获得cDNA 5端序列 | 第20-24页 |
| ·3’RACE获得cDNA 3端序列 | 第24-26页 |
| ·目的片段的回收、纯化 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·DNA片段与T载体的连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆的PCR检测 | 第28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·cDNA全长序列的获得 | 第28-29页 |
| ·ScHP1基因全长的获得 | 第29-32页 |
| ·序列生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·ScHP1基因的亚细胞定位 | 第33-36页 |
| ·荧光定量表达分析 | 第36-38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-55页 |
| ·不同物种在不同钾离子浓度下生理特性的比较 | 第38-41页 |
| ·钾离子浓度对植株株高的影响 | 第38页 |
| ·钾离子浓度对植株根长的影响 | 第38-39页 |
| ·钾离子浓度对植株鲜重的影响 | 第39-40页 |
| ·钾离子浓度对植株干重的影响 | 第40-41页 |
| ·钾离子浓度对植株生理影响的综合评价 | 第41页 |
| ·秦岭黑麦cDNA全长的获得 | 第41-43页 |
| ·秦岭黑麦RNA的提取检测 | 第41-42页 |
| ·ScHP1 cDNA 5’片段的克隆 | 第42页 |
| ·ScHP1 cDNA 3’片段的克隆 | 第42-43页 |
| ·ScHP1 cDNA全长的克隆 | 第43页 |
| ·ScHP1基因全长的获得 | 第43-44页 |
| ·ScHP1 cDNA和基因组DNA序列分析 | 第44-46页 |
| ·ScHP1氨基酸序列分析 | 第46-47页 |
| ·系统发育树的构建 | 第47-48页 |
| ·亚细胞定位 | 第48-49页 |
| ·ScHHP1组织特异性表达分析 | 第49-55页 |
| ·引物的特异性检测 | 第49-50页 |
| ·内参基因和目的基因的标准曲线及扩增曲线 | 第50-52页 |
| ·目的基因的定量表达分析 | 第52-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-57页 |
| ·ScHP1基因的特性 | 第55页 |
| ·ScHP1的细胞定位 | 第55-56页 |
| ·ScHP1基因的表达模式 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 在读期间发表论文 | 第63页 |
