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绵羊NOS基因的克隆及其在布鲁氏菌侵染过程中的作用

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
部分中英文对照的缩写第12-13页
引言第13-14页
第一章 文献综述第14-25页
   ·布鲁氏菌病第14-15页
     ·布鲁氏菌的种类第14页
     ·布鲁氏菌的致病机制第14-15页
   ·一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)第15-16页
     ·NOS的类型第15页
     ·NOS的结构第15页
     ·NOS的催化反应机制第15-16页
   ·一氧化氮(NO)第16-17页
   ·内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的概述第17页
     ·eNOS基因多态性与疾病的关系第17页
     ·eNOS基因多态性对NO影响机制第17页
   ·绵羊eNOS的研究现状第17-18页
     ·有关绵羊eNOS活性调节的研究第17-18页
     ·有关绵羊eNOS表达量调节的研究第18页
   ·基因多态性的检测方法第18-20页
     ·PCR-SSCP技术的原理第19页
     ·PCR-SSCP技术在研究中的应用第19-20页
   ·实时荧光定量PCR(QT-PCR)技术第20-23页
     ·荧光定量PCR中的概念第21页
     ·实时荧光定量PCR的原理第21-22页
     ·实时荧光定量PCR数据分析第22页
     ·实时荧光定量PCR的应用第22-23页
   ·酶联免疫吸附法第23-24页
     ·酶联吸附法的原理第23页
     ·酶联免疫吸附法的应用第23-24页
   ·本研究的目的及意义第24页
   ·技术路线第24-25页
第二章 中国美利奴羊eNOS基因的SNP位点与布鲁氏菌病易感性相关性第25-47页
   ·材料和方法第25-33页
     ·实验材料和仪器第25-26页
     ·常规溶液及培养基配制第26-27页
     ·主要分子生物学软件第27页
     ·试验方法第27-33页
   ·数据处理及统计分析第33页
   ·结果与分析第33-46页
     ·eNOS基因的生物信息学分析第33-34页
     ·布鲁氏菌血清检测结果第34-35页
     ·基因组DNA的提取及纯度和浓度检测结果第35-36页
     ·中国美利奴羊eNOS的PCR扩增产物结果检测第36-41页
     ·SSCP检测第41-44页
     ·不同带型克隆测序结果分析第44-45页
     ·中国美利奴羊eNOS基因多态性与布病易感性关系第45-46页
   ·结论第46-47页
第三章 侵染布鲁氏菌M5小鼠不同时间后小鼠组织和血清中eNOS含量和酶活力测定第47-55页
   ·材料和方法第47-49页
     ·实验材料第47页
     ·常用仪器及试剂第47页
     ·eNOS抑制剂的配制第47页
     ·主要分析软件第47页
     ·试验方法第47-49页
   ·数据处理第49页
   ·结果与分析第49-54页
     ·对侵染小鼠的血清进行虎红平板检测及组织形态观察第49-50页
     ·对侵染不同时期小鼠不同组织中eNOS含量、活力测定结果分析第50-54页
   ·结论第54-55页
第四章 对侵染布鲁氏菌M5后小鼠脾、肝脏中eNOS基因进行QT-PCR分析第55-63页
   ·材料和方法第55-59页
     ·实验材料第55页
     ·常用试剂及仪器第55页
     ·部分试剂配制第55-56页
     ·主要分析软件第56页
     ·试验方法第56-59页
   ·结果与分析第59-62页
     ·小鼠肝、脾总RNA的提取及质量检测第59-60页
     ·Real-time PCR反应条件的优化和引物评估第60-61页
     ·小鼠eNOS基因表达差异分析第61-62页
   ·结论第62-63页
第五章 总结与展望第63-64页
参考文献第64-71页
附录 与人eNOS基因相似性较高的10个外显子上SNP位点信息第71-73页
致谢第73-74页
作者简介第74-75页
附件第75页

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