| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 缩写词表 | 第10-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-29页 |
| ·喹乙醇概述 | 第15-22页 |
| ·喹乙醇的化学结构及合成 | 第15页 |
| ·喹乙醇的理化性质 | 第15-16页 |
| ·喹乙醇的吸收和代谢 | 第16页 |
| ·喹乙醇的毒理学研究 | 第16-19页 |
| ·喹乙醇的检测方法 | 第19-22页 |
| ·时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法 | 第22-27页 |
| ·TRFIA的技术原理及优势分析 | 第22-23页 |
| ·TRFIA的反应模式 | 第23-24页 |
| ·TRFIA的研究进展 | 第24-25页 |
| ·TRFIA的应用 | 第25-27页 |
| ·TRFIA的发展前景 | 第27页 |
| ·本课题研究目的及意义 | 第27-29页 |
| 第二章 喹乙醇人工抗原的制备及鉴定 | 第29-40页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·琥珀酸酐法合成喹乙醇半抗原 | 第30页 |
| ·活化酯法合成喹乙醇人工抗原 | 第30-31页 |
| ·紫外(UV)扫描鉴定喹乙醇人工抗原 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE法鉴定喹乙醇人工抗原 | 第31页 |
| ·OLApAb的制备 | 第31-32页 |
| ·OLApAb的鉴定 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-37页 |
| ·半抗原OLA-HS的鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·OLA人工抗原的鉴定结果 | 第34-36页 |
| ·OLApAb的鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·OLA人工抗原的合成 | 第37页 |
| ·载体蛋白的选择 | 第37-38页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第38页 |
| ·动物选择及免疫程序确定 | 第38-39页 |
| ·本章总结 | 第39-40页 |
| 第三章 喹乙醇单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定 | 第40-56页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40-41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-47页 |
| ·动物免疫 | 第41页 |
| ·小鼠血清效价的测定 | 第41-42页 |
| ·细胞融合 | 第42-45页 |
| ·杂交瘤细胞株的复苏及鉴定 | 第45页 |
| ·腹水(OLA-mAb)的大量制备与纯化 | 第45-46页 |
| ·BCA法测定单抗溶液蛋白含量 | 第46页 |
| ·OLA-mAb免疫学特性鉴定 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·融合小鼠的选择 | 第47页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第47-48页 |
| ·工作浓度的确定 | 第48-49页 |
| ·OLA-mAb蛋白浓度测定结果 | 第49页 |
| ·OLA-mAb类型及亚类鉴定结果 | 第49页 |
| ·OLA-mAb与包被原的交叉反应性鉴定 | 第49-50页 |
| ·OLA-mAb灵敏度检测结果 | 第50页 |
| ·OLA-mAb特异性鉴定结果 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·体外细胞生长的影响因素 | 第51-52页 |
| ·细胞融合的影响因素 | 第52-53页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第53-54页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第54页 |
| ·腹水的大量制备 | 第54页 |
| ·本章总结 | 第54-56页 |
| 第四章 喹乙醇直接竞争TRFIA分析方法的建立 | 第56-83页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·试剂与溶液 | 第56页 |
| ·仪器设备 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-62页 |
| ·dcTRFIA分析方法的基本程序 | 第56-57页 |
| ·Eu~(3+)-OLA-mAb的带0备 | 第57页 |
| ·增强液配方的优化 | 第57-58页 |
| ·dcTRFIA分析方法的优化 | 第58-60页 |
| ·喹乙醇添加回收率测定 | 第60-61页 |
| ·HPLC验证实验 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-78页 |
| ·增强液配方优化 | 第62-64页 |
| ·dcTRFIA体系效果的初步鉴定及dcTRFIA模式参数的设定 | 第64-65页 |
| ·最佳工作浓度组的确定 | 第65-66页 |
| ·最佳包被缓冲液的确定 | 第66-68页 |
| ·Eu~(3+)-OLA-mAb稀释液最佳离子强度的确定 | 第68-69页 |
| ·Eu~(3+)-OLA-mAb稀释液最佳pH值的确定 | 第69-70页 |
| ·OLA标准溶液配制时有机溶剂的确定 | 第70-73页 |
| ·标准曲线的绘制拟合 | 第73-74页 |
| ·喹乙醇添加回收率测定 | 第74-76页 |
| ·HPLC验证实验 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| ·dcTRFIA反应模式的选择 | 第78-79页 |
| ·螯合剂的选择 | 第79页 |
| ·抑制曲线斜率的选择 | 第79页 |
| ·最佳工作浓度的选择 | 第79-80页 |
| ·荧光计数值的选取 | 第80-81页 |
| ·添加回收率实验样品选择 | 第81页 |
| ·实验结果存在波动性的影响因素 | 第81页 |
| ·本章总结 | 第81-83页 |
| 第五章 喹乙醇间接竞争ELISA分析方法的建立 | 第83-99页 |
| ·材料 | 第83页 |
| ·方法 | 第83-86页 |
| ·间接竞争ELLISA(icELISA)分析方法的基本程序 | 第83页 |
| ·最佳工作浓度的选择 | 第83页 |
| ·最佳包被缓冲液的选择 | 第83-84页 |
| ·抗体稀释液最佳离子强度的选择 | 第84页 |
| ·抗体稀释液最佳pH的选择 | 第84页 |
| ·OLA标准溶液配制时最佳有机溶剂的选择 | 第84-85页 |
| ·标准曲线的绘制及拟合 | 第85页 |
| ·喹乙醇添加回收率测定 | 第85-86页 |
| ·HPLC验证实验 | 第86页 |
| ·结果 | 第86-97页 |
| ·最佳工作浓度的确定 | 第86页 |
| ·最佳包被缓冲液的确定 | 第86-89页 |
| ·抗体稀释液最佳离子强度的确定 | 第89-90页 |
| ·抗体稀释液最佳pH的确定 | 第90-91页 |
| ·OLA标准溶液配制时最佳有机溶剂的确定 | 第91-94页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第94页 |
| ·喹乙醇添加回收率测定 | 第94-97页 |
| ·HPLC验证实验 | 第97页 |
| ·讨论 | 第97-98页 |
| ·总结 | 第98-99页 |
| 结论、创新点与展望 | 第99-101页 |
| 1. 结论 | 第99-100页 |
| 2. 创新点 | 第100页 |
| 3. 展望 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-108页 |
| 附录 研究生期间发表论文 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
