摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第1章 绪论 | 第10-20页 |
·立题背景 | 第10-11页 |
·羽扇豆醇简介 | 第11页 |
·microRNA 研究进展 | 第11-14页 |
·microRNA 的发现及其基本特征 | 第11-12页 |
·miRNA 的生物学作用及其与肿瘤的关系 | 第12-14页 |
·miRNA 表达的检测分析方法与技术 | 第14-18页 |
·Northern blot 技术 | 第15页 |
·荧光定量 PCR 技术 | 第15-16页 |
·基于miRNA 的核酸芯片技术 | 第16-18页 |
·课题研究的主要内容 | 第18-20页 |
第2章 材料和方法 | 第20-29页 |
·材料及仪器 | 第20-22页 |
·材料与试剂 | 第20-21页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-29页 |
·细胞miRNA 表达研究的技术路线 | 第22页 |
·细胞培养和处理 | 第22-24页 |
·总 RNA 提取 | 第24-25页 |
·芯片扫描和分析 | 第25-26页 |
·荧光定量 PCR 验证核酸芯片结果 | 第26-29页 |
第3章 细胞的药物处理与总 RNA 提取质量检测 | 第29-32页 |
·处理后的hela 细胞形态学与数量变化 | 第29-30页 |
·总RNA 提取结果检测 | 第30-31页 |
·本章小结 | 第31-32页 |
第4章 核酸芯片扫描和分析 | 第32-43页 |
·药物处理条件下miRNA 表达量的总体差异分析 | 第32-35页 |
·药物处理前后miRNA 表达量在各区间的分布情况 | 第35-37页 |
·相对表达量显著变化的miRNA 筛选及其靶标预测 | 第37-39页 |
·药物处理后相对表达量显著变化的miRNA | 第37页 |
·目的miRNA 的靶标基因预测 | 第37-39页 |
·羽扇豆醇与顺铂调解下潜在共同调节途径的筛选 | 第39-42页 |
·羽扇豆醇与顺铂调节miRNA 表达情况的对比 | 第39-41页 |
·潜在目的miRNA 靶标基因的筛选 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
第5章 荧光定量 PCR | 第43-57页 |
·荧光定量RT—PCR 标准品的制备 | 第43-44页 |
·标准曲线绘制 | 第44-47页 |
·反转录效率的检测 | 第47-48页 |
·内参U6 荧光定量PCR 检测 | 第48-50页 |
·miR-504 荧光定量PCR 检测 | 第50-53页 |
·miR-34a 荧光定量PCR 检测 | 第53-56页 |
·本章小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录一: 羽扇豆醇处理条件下相对表达量具有显著差异的miRNA | 第65-71页 |
附录二: 成簇分布miRNA 的靶标基因 | 第71-84页 |
附录三: 所有样品目标miRNA 荧光定量 PCR 扩增曲线 | 第84-102页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第102-104页 |
致谢 | 第104页 |