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细胞内表达人源C-型凝集素2A(CLEC2A)基因抗肿瘤的机制研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略词第8-11页
1 引言第11-16页
   ·肿瘤治疗的研究进展第11-13页
     ·癌症的治疗新方法—基因治疗第11-12页
     ·细胞免疫治疗—NK细胞对抗肿瘤第12-13页
   ·凝集素的研究进展第13-15页
     ·C型凝集素的概况及研究现状第13-15页
   ·论文研究基础第15页
   ·实验方案设计第15-16页
     ·实验的目的和意义第15-16页
     ·研究内容第16页
2 实验材料与方法第16-39页
   ·实验材料第16-20页
     ·实验主要质粒、菌株及细胞株第16-17页
     ·主要生化试剂第17页
     ·主要试剂配制第17-19页
     ·主要仪器第19页
     ·引物合成第19-20页
   ·实验方法第20-39页
     ·分子实验常用实验方法第20-24页
     ·重组质粒pCDNA 3.1+-dsRED-GENE的构建第24-26页
     ·包装溶瘤腺病毒AD-CLEC2A1所需载体的构建第26-30页
     ·包装溶瘤痘苗病毒VV-CLEC2A1所需载体的构建第30-31页
     ·细胞的培养第31-33页
     ·CLEC2A1的真核表达鉴定第33页
     ·细胞内表达CLEC2A1蛋白的亚细胞定位第33-34页
     ·病毒实验部分第34-39页
3 实验结果第39-53页
   ·腺病毒包装过程的鉴定结果第39-44页
     ·重组质粒pEGFP-CLEC2A1-C1、pCDNA3.1+-dsRED-GENE的鉴定第39-42页
     ·重组质粒pCA13-Flag-CLEC2A1的鉴定第42页
     ·重组质粒pSHUTTLE- Flag-CLEC2A1的鉴定第42-43页
     ·重组质粒pAD- Flag-CLEC2A1的鉴定第43-44页
   ·腺病毒的包装、鉴定、扩增以及滴度测定第44-46页
     ·AD-Flag-CLEC2A1腺病毒目的基因的鉴定第44-45页
     ·AD-Flag-CLEC2A1腺病毒野毒的鉴定第45-46页
   ·痘苗病毒包装过程的鉴定结果第46-48页
     ·重组质粒pCB-Flag-CLEC2A1的鉴定第46页
     ·重组OncoPox-Flag-CLEC2A1中目的基因的鉴定第46-47页
     ·重组OncoPox-Flag-CLEC2A1中野生型痘苗病毒的鉴定第47-48页
   ·肿瘤细胞内过表达CLEC2A1基因第48-51页
     ·CLEC2A1基因毒性的鉴定第48-50页
     ·肿瘤细胞内与CLEC2A1蛋白发生相互作用的蛋白质的探究第50-51页
   ·体外实验检测病毒对恶性肿瘤的杀伤效果第51-53页
     ·MTT法检测重组病毒对恶性肿瘤的杀伤能力第51-52页
     ·Western blot检测相关凋亡因子第52-53页
4 讨论第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-58页
致谢第58页

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