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利用胚胎干细胞神经分化模型对多溴联苯醚神经发育毒性机制的研究

缩写词表第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
前言第13-15页
第一章 胚胎干细胞体外神经定向分化模型的建立及验证第15-26页
 1 材料和方法第15-19页
   ·仪器与试剂第15-16页
   ·培养基的配制第16页
   ·方法第16-19页
     ·模型建立第16-17页
     ·模型验证第17-19页
       ·利用Real-Time PCR检测神经标记表达基因表达第17-18页
       ·利用免疫组织化学方法检测多巴胺能神经元特异蛋白表达第18页
       ·选用多巴胺能神经元选择性毒素MPTP逆向检测多巴胺能神经元的存在-第18-19页
       ·利用高效液相色谱法检测多巴胺水平分泌第19页
   ·数据处理及统计学分析第19页
 2 结果第19-24页
   ·神经标记基因表达第19-21页
   ·巢蛋白抗体和酪氨酸羟化酶的表达第21-22页
   ·多巴胺能神经元选择性毒物逆向检测多巴胺能神经元的存在第22-23页
   ·高效液相色谱法检测多巴胺分泌第23-24页
 3 讨论第24-26页
第二章 PBDEs对体外神经分化控制基因的影响,以及甲状腺素的作用第26-44页
 1 材料和方法第26-29页
   ·仪器与试剂第26-27页
   ·方法第27-29页
     ·细胞培养及处理第27页
       ·多溴联苯醚的处理及剂量设置第27页
       ·甲状腺素的剂量设置第27页
     ·Real-Time PCR检测分化控制基因表达第27-29页
   ·数据处理及统计学分析第29页
 2 结果第29-43页
   ·无甲状腺素作用下,PBDEs对神经发育相关基因的影响第29-31页
   ·有甲状腺素作用下,PBDEs对神经发育相关基因的影响第31-43页
 3 讨论第43-44页
第三章 PBDEs对神经分化过程的氧化应激作用、凋亡诱导作用,甲状腺激素对此过程的影响第44-67页
 1 材料和方法第44-47页
   ·仪器与试剂第44-45页
   ·方法第45-47页
     ·细胞培养及处理第45页
     ·氧化应激所需细胞样品收集第45页
     ·氧化负荷水平检测第45-46页
     ·抗氧化能力检测第46页
     ·凋亡检测细胞前处理第46页
     ·Annexin FITC/PI双染法、流式细胞术检测凋亡率第46-47页
   ·数据处理及统计学分析第47页
 2 结果第47-66页
   ·PBDEs对细胞氧化负荷和抗氧化能力的影响,以及甲状腺素对此的作用第47-49页
   ·甲状腺素作用下,PBDEs对细胞氧化负荷和抗氧化能力的影响第49-57页
   ·PBDEs诱发凋亡状况第57-66页
 3 讨论第66-67页
第四章 PBDEs对神经分化的细胞毒性,以及甲状腺激素的作用第67-75页
 1 材料和方法第67-69页
   ·仪器与试剂第67-68页
   ·方法第68页
     ·细胞培养及处理第68页
     ·细胞样品收集第68页
     ·细胞膜唾液酸含量检测第68页
     ·细胞膜钠钾ATP酶(Na+-K+ ATPase)活性检测第68页
     ·细胞膜钙镁ATP酶(Ca2+-Mg2-ATPase)活性检测第68页
   ·数据处理及统计学分析第68-69页
 2 结果第69-74页
   ·PBDEs对唾液酸含量的影响,以及甲状腺素对此的作用第69页
   ·PBDEs对钠钾ATP酶活力的影响,以及甲状腺素对此的作用第69页
   ·PBDEs对钙镁ATP酶活力的影响,以及甲状腺素对此的作用第69-74页
 3 讨论第74-75页
第五章 PBDEs对神经分化中突触延伸和突触联系建立的影响,以及甲状腺激素对此过程的影响第75-92页
 1 材料和方法第75-78页
   ·仪器与试剂第75-76页
   ·方法第76-77页
     ·细胞培养及处理第76页
     ·PBDEs对神经元突触延伸和突触联系建立的影响,甲状腺激素对此的影响第76-77页
       ·免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF)测量树突与轴突的长度第76-77页
       ·免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF)检测突触前蛋白synapsin-1和突触后蛋白PSD-95的密度第77页
   ·数据统计分析第77-78页
 2 结果第78-91页
   ·PBDEs对神经分化中树突、轴突长度的影响,以及甲状腺素对此的作用第78-84页
   ·PBDEs对突触前蛋白synapsin-1和突触后蛋白PSD-95表达的影响,以及甲状腺素对此的作用第84-91页
 3 讨论第91-92页
全文结论第92-93页
参考文献第93-98页
致谢第98-99页
个人简历第99-100页
论著第100-113页

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