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生物荧光探针在活细胞成像中的研究与应用

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第1章 绪论第13-25页
   ·基于核酸的生物荧光探针第13-17页
     ·功能核酸第13-14页
     ·核酸适配体第14页
     ·基于核酸适配体探针在细胞成像中的应用第14-17页
   ·基于发光纳米颗粒的生物荧光探针第17-21页
     ·量子点第17-18页
     ·发光二氧化硅纳米颗粒第18页
     ·基于发光纳米颗粒探针在细胞成像中的应用第18-21页
   ·基于氧化石墨烯的生物荧光探针第21-23页
     ·氧化石墨烯第21页
     ·基于氧化石墨烯探针在细胞成像中的应用第21-23页
   ·本研究论文的工作内容第23-25页
第2章 基于锚定在细胞膜上的生物荧光探针用于实时可视化检测ATP的释放第25-39页
   ·前言第25-26页
   ·实验部分第26-27页
     ·试剂与仪器第26页
     ·DNA的杂交以及在溶液中检测ATP第26-27页
     ·细胞培养以及膜上传感器对ATP的成像分析第27页
   ·结果与讨论第27-38页
     ·实验设计原理第27-28页
     ·杂交比例优化实验第28-29页
     ·溶液中ATP的检测以及对探针选择性的考查第29-31页
     ·传感器锚定在膜上方法的考查第31-32页
     ·锚定在膜上的传感器对ATP的响应能力的研究第32-35页
     ·锚定在膜上的传感器实时成像检测细胞内ATP的释放第35-38页
   ·小结第38-39页
第3章还原型谷胱甘肽合成的金纳米簇用于高活性氧物质的检测第39-47页
   ·前言第39-40页
   ·实验部分第40-41页
     ·试剂与仪器第40页
     ·金纳米簇(Au NCs)的合成第40-41页
     ·ROS的制备第41页
     ·Au NCs对h ROS的响应第41页
   ·结果与讨论第41-46页
     ·实验设计原理与验证第41-43页
     ·Au NCs的表征第43页
     ·Au NCs对不同ROS选择性响应的考查第43-44页
     ·基于Au NCs对三种h ROS的检测第44-46页
   ·小结第46-47页
第4章金纳米簇-硅复合荧光纳米颗粒用于活细胞内h ROS的检测第47-66页
   ·前言第47-48页
   ·实验部分第48-51页
     ·试剂与仪器第48-49页
     ·Au NCs-CPP结合物的合成第49页
     ·掺杂染料硅颗粒的合成以及花冠型荧光纳米复合物的合成第49-50页
     ·DEFN纳米复合物对h ROS的响应第50页
     ·细胞培养以及MTT实验第50页
     ·活细胞内h ROS的荧光成像分析第50-51页
   ·结果与讨论第51-65页
     ·实验设计原理与验证第51-53页
     ·复合纳米材料的表征第53-54页
     ·比例型荧光纳米探针DEFN对三种h ROS的工作曲线图第54-55页
     ·复合型荧光纳米探针DEFN选择性的考查第55-56页
     ·DEFN对细胞毒性的考查第56-57页
     ·活细胞内DEFN性质的研究第57-59页
     ·DEFN用于活细胞内h ROS的成像分析第59-65页
   ·小结第65-66页
第5章 PEG化的氧化石墨烯-核酸适配体纳米复合物用于细胞色素C的检测第66-78页
   ·前言第66-67页
   ·实验部分第67-69页
     ·试剂与仪器第67页
     ·PEG化的氧化石墨烯-核酸适配体纳米复合物的合成与组装第67-68页
     ·细胞培养与细胞胞质蛋白的提取第68页
     ·细胞色素C的测定第68-69页
   ·结果与讨论第69-77页
     ·实验设计原理和验证第69-70页
     ·PEG化的氧化石墨烯(GO-PEG)-核酸适配体纳米复合物的表征第70-72页
     ·实验条件的优化第72页
     ·GO-PEG优于GO的验证第72-74页
     ·GO-PEG吸附核酸适配体探针选择性的考查第74-76页
     ·细胞裂解液体系中对细胞色素C的检测第76-77页
   ·小结第77-78页
第6章基于核酸适配体纳米探针的荧光激活式成像研究细胞色素C的释放第78-93页
   ·前言第78-79页
   ·实验部分第79-82页
     ·试剂与仪器第79-80页
     ·基于PEG化的氧化石墨烯纳米复合物的制备第80页
     ·氧化石墨烯纳米复合物上DNA和PEG的负载量的计算第80页
     ·细胞培养、MTT实验以及腺病毒转导第80-81页
     ·活细胞荧光成像第81-82页
   ·结果与讨论第82-92页
     ·实验设计原理和验证第82页
     ·探针对细胞的毒性试验第82-83页
     ·探针在细胞内分布情况的研究第83-84页
     ·在探针上引入叶酸对进细胞的效率研究第84-85页
     ·探针对从线粒体释放出来的细胞色素C的响应第85-87页
     ·细胞凋亡前后线粒体形貌变化的研究第87-88页
     ·探针应用于细胞凋亡的研究第88-90页
     ·探针应用于药物筛选的研究第90-92页
   ·小结第92-93页
结论第93-95页
参考文献第95-116页
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录第116-117页
致谢第117页

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