| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| ·植物转录因子研究 | 第9-11页 |
| ·植物转录因子的特征与种类 | 第9-10页 |
| ·植物转录因子的研究方法 | 第10-11页 |
| ·植物MYB转录因子研究进展 | 第11-14页 |
| ·植物中的MYB转录因子的结构特征与分类 | 第11-12页 |
| ·植物MYB转录因子的起源与进化 | 第12页 |
| ·植物MYB转录因子的功能 | 第12-14页 |
| ·无选择标记基因及安全选择标记基因转基因植物研究进展 | 第14-17页 |
| ·无选择标记基因的转化系统 | 第15-16页 |
| ·生物安全标记基因研究进展 | 第16-17页 |
| ·PMI甘露糖转化系统的研究进展 | 第17页 |
| ·本项研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 2 津田芜菁MYB转录因子基因的克隆及序列分析 | 第19-28页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·植物材料培养及取材 | 第19页 |
| ·菌种及试剂 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-24页 |
| ·‘津田’芜菁总RNA的提取(TRNzol) | 第19-20页 |
| ·‘津田’芜菁MYB基因的克隆 | 第20-24页 |
| ·津田芜菁MYB序列分析 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·总RNA电泳及浓度检测 | 第24页 |
| ·‘津田’芜菁MYB基因全长克隆 | 第24-27页 |
| ·讨论 | 第27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 3 津田芜菁BrMYB77转录因子的亚细胞定位 | 第28-32页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-30页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·真空渗透法转化洋葱表皮细胞 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-31页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第30页 |
| ·重组质粒在洋葱表皮细胞中的瞬时表达 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 4 津田芜菁BrMYB77原核表达诱导及纯化 | 第32-39页 |
| ·试验材料 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-36页 |
| ·引物设计与合成 | 第32页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第34-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第36页 |
| ·GST-BrMYB77融合蛋白的表达及SDS-PAGE电泳检测 | 第36-37页 |
| ·表达产物的纯化及Western印迹检测 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 5 津田芜菁pCAMBIA1301-PMI-BrMYB77表达载体的构建及番茄的遗传转化 | 第39-63页 |
| ·试验材料 | 第39-41页 |
| ·供试菌株、抗生素、质粒和种子 | 第39-40页 |
| ·酶和试剂 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-50页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-PMI-GW的构建 | 第41-45页 |
| ·pCAMBIA1301-PMI-BrMYB77植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·pCAMBIA1301-PMI-BrMYB77植物表达载体转化农杆菌 | 第47-48页 |
| ·甘露糖筛选浓度的确定 | 第48页 |
| ·农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第48-49页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第49页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-61页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-PMI-GW的构建 | 第50-55页 |
| ·pCAMBIA1301-PMI-BrMYB77植物表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·农杆菌转化菌株的鉴定 | 第57-58页 |
| ·不同浓度的甘露糖对外植体再生的抑制作用 | 第58-59页 |
| ·农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第59-60页 |
| ·再生植株PCR检测 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
