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藏系绵羊MSX2基因皮肤特异表达载体构建及功能分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
前言第10-11页
第1章 文献综述同源异形盒基因(HOX)的研究进展第11-21页
   ·Hox基因的发现和特性第11-13页
   ·Hox基因的分类第13-14页
   ·Hox基因的功能研究第14-19页
     ·Hox基因与胚胎发生第14-16页
     ·Hox基因与疾病发生第16页
     ·Hox基因与皮肤毛囊发育第16-19页
   ·MSX2基因的研究进展第19-21页
第2章 藏系绵羊MSX2基因的克隆测序和组织表达谱分析第21-33页
   ·材料第21-23页
     ·样品的采集及处理第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·主要试剂配制第22-23页
   ·方法第23-27页
     ·藏系绵羊组织总RNA的提取及反转录第23-24页
     ·引物的设计与合成第24页
     ·MSX2基因的扩增、克隆及测序第24-26页
     ·MSX2基因组织表达的定量分析第26-27页
     ·数据分析第27页
   ·结果与分析第27-31页
     ·MSX2基因的克隆测序第27页
     ·藏系绵羊MSX2基因序列分析第27-30页
     ·MSX2基因的组织表达分析第30-31页
   ·讨论第31-33页
第3章 MSX2基因真核表达载体的构建第33-39页
   ·材料第33-34页
     ·载体信息第33页
     ·主要试剂第33-34页
     ·主要仪器第34页
   ·方法第34-36页
     ·双酶切引物设计第34页
     ·MSX2基因CDS区扩增第34页
     ·真核载体获得第34-35页
     ·皮肤特异表达载体pCDsR-KM的构建第35-36页
     ·重组载体的酶切鉴定及测序第36页
   ·结果与分析第36-38页
     ·MSX2基因扩增和真核载体获得第36-37页
     ·真核载体的鉴定和测序第37-38页
   ·讨论第38-39页
第4章 真核载体的转染及流式细胞术筛选转染细胞第39-46页
   ·材料第39-40页
     ·细胞信息第39页
     ·主要试剂第39-40页
     ·主要仪器第40页
     ·主要试剂配制第40页
   ·方法第40-43页
     ·细胞的活化及传代培养第40-41页
     ·转染条件优化第41-42页
     ·真核载体转染毛囊内根鞘细胞第42页
     ·流式细胞术筛选转染细胞第42-43页
   ·结果与分析第43-45页
     ·转染条件优化第43页
     ·转染结果第43页
     ·流式细胞术筛选转染细胞第43-45页
   ·讨论第45-46页
第5章 毛囊内根鞘细胞中MSX2基因及下游靶基因的表达检测第46-57页
   ·材料第46-49页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46-47页
     ·主要试剂配制第47-49页
   ·方法第49-52页
     ·MSX2基因及靶基因定量引物设计第49页
     ·转染细胞的RNA及蛋白质提取第49-50页
     ·MSX2及其靶基因表达的定量分析第50-51页
     ·Notch1和Notch2蛋白质的Western blot分析第51-52页
   ·结果与分析第52-55页
     ·转染细胞的RNA及蛋白质提取第52页
     ·MSX2及其靶基因表达的定量第52-54页
     ·Notch1和Notch2蛋白质的Western blot分析第54-55页
   ·讨论第55-57页
结论第57-58页
参考文献第58-65页
附件:攻读硕士学位期间发表论文第65-66页
致谢第66-67页

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