摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第1章 文献综述同源异形盒基因(HOX)的研究进展 | 第11-21页 |
·Hox基因的发现和特性 | 第11-13页 |
·Hox基因的分类 | 第13-14页 |
·Hox基因的功能研究 | 第14-19页 |
·Hox基因与胚胎发生 | 第14-16页 |
·Hox基因与疾病发生 | 第16页 |
·Hox基因与皮肤毛囊发育 | 第16-19页 |
·MSX2基因的研究进展 | 第19-21页 |
第2章 藏系绵羊MSX2基因的克隆测序和组织表达谱分析 | 第21-33页 |
·材料 | 第21-23页 |
·样品的采集及处理 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·主要试剂配制 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·藏系绵羊组织总RNA的提取及反转录 | 第23-24页 |
·引物的设计与合成 | 第24页 |
·MSX2基因的扩增、克隆及测序 | 第24-26页 |
·MSX2基因组织表达的定量分析 | 第26-27页 |
·数据分析 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-31页 |
·MSX2基因的克隆测序 | 第27页 |
·藏系绵羊MSX2基因序列分析 | 第27-30页 |
·MSX2基因的组织表达分析 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第3章 MSX2基因真核表达载体的构建 | 第33-39页 |
·材料 | 第33-34页 |
·载体信息 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·双酶切引物设计 | 第34页 |
·MSX2基因CDS区扩增 | 第34页 |
·真核载体获得 | 第34-35页 |
·皮肤特异表达载体pCDsR-KM的构建 | 第35-36页 |
·重组载体的酶切鉴定及测序 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-38页 |
·MSX2基因扩增和真核载体获得 | 第36-37页 |
·真核载体的鉴定和测序 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
第4章 真核载体的转染及流式细胞术筛选转染细胞 | 第39-46页 |
·材料 | 第39-40页 |
·细胞信息 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39-40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·主要试剂配制 | 第40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·细胞的活化及传代培养 | 第40-41页 |
·转染条件优化 | 第41-42页 |
·真核载体转染毛囊内根鞘细胞 | 第42页 |
·流式细胞术筛选转染细胞 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-45页 |
·转染条件优化 | 第43页 |
·转染结果 | 第43页 |
·流式细胞术筛选转染细胞 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第5章 毛囊内根鞘细胞中MSX2基因及下游靶基因的表达检测 | 第46-57页 |
·材料 | 第46-49页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46-47页 |
·主要试剂配制 | 第47-49页 |
·方法 | 第49-52页 |
·MSX2基因及靶基因定量引物设计 | 第49页 |
·转染细胞的RNA及蛋白质提取 | 第49-50页 |
·MSX2及其靶基因表达的定量分析 | 第50-51页 |
·Notch1和Notch2蛋白质的Western blot分析 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-55页 |
·转染细胞的RNA及蛋白质提取 | 第52页 |
·MSX2及其靶基因表达的定量 | 第52-54页 |
·Notch1和Notch2蛋白质的Western blot分析 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
附件:攻读硕士学位期间发表论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |