| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-25页 |
| 第一节 选题依据、目的及意义 | 第16-18页 |
| 第二节 国内外研究进展 | 第18-25页 |
| 一、 影响植物开花期的主要因素及光受体 | 第18-19页 |
| 二、 光敏色素结合因子 | 第19-22页 |
| （一） PIFs 因子的结构 | 第20-21页 |
| （二） PIFs 因子的鉴定及功能研究 | 第21-22页 |
| （三） PIFs 因子在光形态建成和光信号途径中的作用 | 第22页 |
| 三、 大豆生育期基因的鉴定与分子克隆 | 第22-23页 |
| 四、 酵母双杂交技术 | 第23-24页 |
| 五、 大豆遗传转化技术 | 第24-25页 |
| 第二章 参与调控大豆光周期不敏感性基因的研究 | 第25-35页 |
| 第一节 实验材料与方法 | 第25-27页 |
| 一、 实验材料 | 第25页 |
| （一） 植物材料 | 第25页 |
| （二） 酶及其他试剂 | 第25页 |
| 二、 实验方法 | 第25-27页 |
| （一） 53 份光周期不敏感材料的基因型鉴定 | 第25-26页 |
| （二） 53 份材料的开花期及生育期调查 | 第26页 |
| （三） 53 份材料开花后主茎节数统计 | 第26页 |
| （四） Harosoy 及其近等基因系主茎节数、豆荚个数和 Dt1 基因的表达分析 | 第26-27页 |
| 第二节 结果与分析 | 第27-35页 |
| 一、 53 份光周期不敏感大豆材料基因型鉴定 | 第27-28页 |
| （一） 基因型鉴定结果 | 第27页 |
| （二） 根据鉴定结果对 53 份材料进行分组 | 第27-28页 |
| 二、 E3 和 E4 在大豆开花后的作用 | 第28-35页 |
| （一） E3 和 E4 对大豆生育期的影响 | 第28-30页 |
| （二） E3 和 E4 调控大豆开花后茎的生长和豆荚的发育 | 第30-35页 |
| 第三章 大豆 E4 基因突变类型的遗传转化分析 | 第35-56页 |
| 第一节 实验材料与方法 | 第35-51页 |
| 一、 实验材料 | 第35-36页 |
| （一） 植物材料 | 第35页 |
| （二） 菌株与载体 | 第35页 |
| （三） 酶及其他试剂 | 第35-36页 |
| （四） 试剂盒 | 第36页 |
| （五） 引物合成及测序 | 第36页 |
| 二、 实验方法 | 第36-51页 |
| （一） 大豆 e4 基因的克隆及载体构建 | 第36-42页 |
| （二） 拟南芥遗传转化分析 e4 基因功能 | 第42-51页 |
| 第二节 结果与分析 | 第51-56页 |
| 一、 大豆 E4 基因的克隆与拟南芥表达载体的构建 | 第51-54页 |
| 二、 拟南芥遗传转化分析 | 第54-56页 |
| 第四章 GMPHYA2 与 GMPIF3 相互作用的验证 | 第56-77页 |
| 第一节 实验材料与方法 | 第56-69页 |
| 一、 实验材料 | 第56页 |
| （一） 植物材料 | 第56页 |
| （二） 菌株与载体 | 第56页 |
| （三） 酶及其他试剂 | 第56页 |
| 二、 实验方法 | 第56-69页 |
| （一） 酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第57-62页 |
| （二） 酵母双杂交 AD 载体的构建 | 第62-66页 |
| （三） 酵母双杂交法验证 GmPhyA2 与 GmPIF3 的相互作用 | 第66-69页 |
| 第二节 结果与分析 | 第69-77页 |
| 一、 GMPIF3 序列分析和结构域的确定 | 第69-70页 |
| 二、 GMPIF3 与 GMPHYA2 相互作用的酵母双杂交实验 | 第70-77页 |
| （一） 诱饵片段的克隆、序列分析与 BD 载体的构建 | 第71-72页 |
| （二） GmPIF3 基因的克隆与 AD 载体的构建 | 第72-74页 |
| （三） 诱饵载体的自激活检测 | 第74-75页 |
| （四） 酵母双杂交检测 GmPhyA2 与 GmPIF3 的相互作用 | 第75页 |
| （五） 双分子荧光法验证 GmPIF3 与 GmPhyA2 的相互作用 | 第75-77页 |
| 第五章 利用酵母 CDNA 文库筛选与 GMPHYA2 相互作用的蛋白 | 第77-86页 |
| 第一节 实验材料与方法 | 第77-84页 |
| 一、 实验材料 | 第77页 |
| （一） 植物材料 | 第77页 |
| （二） 实验试剂 | 第77页 |
| 二、 实验方法 | 第77-84页 |
| （一） 大豆材料处理 | 第77页 |
| （二） 大豆材料总 RNA 提取 | 第77-78页 |
| （三） cDNA 文库的构建 | 第78-81页 |
| （四） 筛选文库 | 第81-83页 |
| （五） 序列分析 | 第83-84页 |
| 第二节 结果与分析 | 第84-86页 |
| 一、 文库的转化及转化效率的计算 | 第84页 |
| 二、 阳性克隆的筛选 | 第84页 |
| 三、 阳性克隆序列分析 | 第84-86页 |
| （一） 酵母质粒的提取及阳性克隆的 PCR 检测 | 第84-85页 |
| （二） 序列信息的获得及候选目标基因的分析 | 第85-86页 |
| 第六章 大豆遗传转化法研究 GMPIF3 的功能 | 第86-96页 |
| 第一节 实验材料与方法 | 第86-91页 |
| 一、 实验材料 | 第86页 |
| （一） 植物材料 | 第86页 |
| （二） 菌种与载体 | 第86页 |
| （三） 酶及其他试剂 | 第86页 |
| 二、 实验方法 | 第86-91页 |
| （一） 相关培养基 | 第86-87页 |
| （二） 根癌农杆菌介导的大豆遗传转化方法 | 第87-89页 |
| （三） 转 GmPIF3 基因大豆的鉴定 | 第89-91页 |
| 第二节 结果与分析 | 第91-96页 |
| 一、 转 GMPIF3 基因大豆的获得 | 第91-94页 |
| （一） pTF101-GmPIF3 载体的构建与鉴定 | 第91-92页 |
| （二） 转基因植株鉴定 | 第92-94页 |
| 二、 转 GMPIF3 基因大豆表型分析 | 第94-96页 |
| （一） 下胚轴生长情况 | 第94-95页 |
| （二） 开花期统计分析 | 第95-96页 |
| 第七章 讨论 | 第96-101页 |
| 第八章 结论 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-112页 |
| 发表文章目录 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
