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克氏原螯虾卵黄蛋白原和受体的cDNA序列克隆及受体mRNA的表达量分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
引言第14-20页
 1.十足目甲壳动物卵黄蛋白原的研究第15-17页
   ·卵黄蛋白及卵黄蛋白原第15-17页
     ·卵黄以及卵黄蛋白原定义第15页
     ·卵黄发生与卵黄蛋白原合成第15-16页
     ·卵黄蛋白原的结构第16页
     ·卵黄蛋白原的功能第16-17页
   ·十足目甲壳动物卵黄蛋白原的研究进展第17页
 2.十足目甲壳动物卵黄蛋白原受体的研究第17-18页
   ·卵黄蛋白原受体第17-18页
   ·十足目甲壳动物卵黄蛋白原受体的研究进展第18页
 3 mRNA 差异表达研究主要方法第18-20页
   ·半定量 PCR 技术第18-19页
   ·实时荧光定量 PCR 技术第19-20页
第一章 克氏原螯虾卵黄蛋白原 cDNA 序列全长的克隆与结构分析第20-36页
   ·材料和方法第20-25页
     ·实验材料第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·实验方法第21-25页
       ·总 RNA 的提取第21页
       ·cDNA 的合成第21-22页
       ·引物的设计与合成第22-24页
       ·克氏原螯虾卵黄蛋白原基因分析第24页
       ·克氏原螯虾卵黄蛋白原 cDNA 信息学分析第24-25页
   ·结果第25-34页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原 cDNA 序列全长的克隆及结构预测分析第25-30页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原进化树构建第30-32页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原理化性质预测分析第32页
     ·克氏原螯虾跨膜结构预测第32-33页
     ·克氏原螯虾结构域预测第33-34页
   ·讨论第34-36页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原 cDNA 及氨基酸序列分析第34页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原理化性质特性及表达部位分析第34页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原结构域分析第34-36页
第二章 克氏原螯虾卵黄蛋白原受体 cDNA 部分序列克隆及表达量研究第36-55页
   ·材料和方法第36-41页
     ·实验材料第36页
     ·主要仪器第36页
     ·实验方法第36-41页
       ·总 RNA 的提取第36-37页
       ·2%甲醛变性胶电泳第37页
       ·cDNA 的合成第37页
       ·引物的设计与合成第37-38页
       ·PCR 条件优化第38-39页
       ·扩增产物的纯化与测序第39-40页
       ·DNA 琼脂糖电泳检测第40页
       ·克氏原螯虾卵黄蛋白原受体基因分析第40页
       ·卵巢分期第40页
       ·荧光定量 PCR 检测及数据计算第40-41页
   ·结果第41-52页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原受体部分 cDNA 序列的克隆及结构分析第41-42页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原受体进化树构建第42-43页
     ·克氏原螯虾卵巢和肝胰腺总 RNA 完整性分析第43-44页
     ·定量研究所用 18S 和目的基因保守性分析第44-45页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原受体半定量 PCR 分析第45-46页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原受体的荧光定量 PCR 分析第46-52页
       ·克氏原螯虾卵黄蛋白原受体 mRNA 基因与 18s rRNA 基因的标准曲线和溶解曲线第46-48页
       ·卵巢和肝胰腺中卵黄蛋白原受体 mRNA 基因的相对表达量第48-49页
       ·卵巢和肝胰腺中卵黄蛋白原受体 mRNA 基因的表达量及贡献率第49-52页
   ·讨论第52-55页
     ·序列克隆结果构建的进化树讨论第52-53页
     ·卵黄蛋白原受体不同时期相对表达量的研究第53页
     ·卵黄蛋白原受体与卵黄蛋白原表达量的联系第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61页

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