| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 图与列表清单 | 第12-15页 |
| 缩略词 | 第15-18页 |
| 第一章 引言 | 第18-41页 |
| 第一节 泡沫病毒概述 | 第18-29页 |
| ·泡沫病毒的发现 | 第18-21页 |
| ·泡沫病毒的基本生物学特征 | 第21-29页 |
| 第二节 泡沫病毒的复制与基因表达调控 | 第29-35页 |
| ·泡沫病毒的启动子 | 第29-31页 |
| ·泡沫病毒的生活周期 | 第31-34页 |
| ·泡沫病毒的宿主范围及其致病性分析 | 第34-35页 |
| 第三节 泡沫病毒的传播 | 第35-38页 |
| ·Cell-free病毒的感染 | 第35-36页 |
| ·Cell-to-cell的感染方式 | 第36-38页 |
| 第四节 泡沫病毒的感染性克隆 | 第38-39页 |
| 第五节 本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
| ·本研究的前期基础 | 第39页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第39-41页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第41-63页 |
| 第一节 实验材料 | 第41-45页 |
| ·病毒 | 第41页 |
| ·细胞 | 第41页 |
| ·菌株 | 第41-42页 |
| ·质粒 | 第42-44页 |
| ·试剂 | 第44-45页 |
| 第二节 实验方法 | 第45-63页 |
| ·基因操作 | 第45-49页 |
| ·细胞培养及质粒的转染 | 第49-50页 |
| ·病毒培养及cell-free BFV筛选 | 第50-51页 |
| ·Hirt DNA的提取 | 第51页 |
| ·萤火虫荧光素酶活性测定(Luciferase activity assay) | 第51-52页 |
| ·GST标签蛋白的纯化 | 第52页 |
| ·包涵体蛋白的纯化 | 第52-53页 |
| ·多克隆抗体的制备及效价分析 | 第53-54页 |
| ·收集抗体血清 | 第54页 |
| ·电泳迁移率阻滞实验 | 第54-56页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE电泳 | 第56页 |
| ·免疫印迹(Western Blotting) | 第56-57页 |
| ·免疫荧光分析(Immunofluorescence assay,IFA) | 第57-58页 |
| ·交联实验 | 第58-59页 |
| ·病毒滴度的测定(梯度稀释法) | 第59页 |
| ·反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR) | 第59-60页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第60-62页 |
| ·统计学分析 | 第62-63页 |
| 第三章 结果与分析 | 第63-108页 |
| 第一节 BFV感染性克隆的构建 | 第63-70页 |
| ·BFV3026原病毒DNA感染性克隆的构建 | 第63-64页 |
| ·pBS-BFV的活性分析 | 第64-70页 |
| 第二节 pBS-BFV-B和pBS-BFV-Y间的活性差异分析 | 第70-92页 |
| ·pBS-BFV-B和pBS-BFV-Y间的活性差异 | 第71-73页 |
| ·pBS-BFV-B和pBS-BFV-Y嵌合体活性分析 | 第73-80页 |
| ·BTas-B和BTas-Y反式转录激活功能分析 | 第80-92页 |
| 第三节 Cell-free BFV的筛选 | 第92-100页 |
| ·Cell-free BFV的筛选方法 | 第92-94页 |
| ·验证cell-free BFV3026的感染性 | 第94-100页 |
| 第四节 BBet蛋白对BFV3026复制的影响 | 第100-108页 |
| ·bbet基因的发现 | 第100-101页 |
| ·bbet基因的验证 | 第101-102页 |
| ·BBet蛋白的细胞定位 | 第102-104页 |
| ·BBet蛋白可负调控BFV3026的复制 | 第104-106页 |
| ·BBet蛋白可抑制cell-free BFV3026的复制 | 第106-108页 |
| 第四章 讨论 | 第108-118页 |
| 第一节 古老而特殊的泡沫病毒 | 第108-109页 |
| 第二节 泡沫病毒的反式激活因子Tas | 第109-113页 |
| ·泡沫病毒的Tas蛋白 | 第110-111页 |
| ·BTas蛋白第108位氨基酸的功能分析 | 第111-113页 |
| 第三节 Bet蛋白在泡沫病毒生活周期中的神秘功能 | 第113-115页 |
| 第四节 防患于未然 | 第115-118页 |
| 第五章 结论与展望 | 第118-120页 |
| 第一节 结论 | 第118页 |
| 第二节 展望 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第137页 |
