| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·植物抵御非生物胁迫的分子机制研究现状 | 第12页 |
| ·低温响应途径 | 第12-15页 |
| ·CBF 依赖型途径（ICE- CBF- COR） | 第13-15页 |
| ·ICE1 | 第13-14页 |
| ·CBF（C-repeat-binding factor CBF 转录因子） | 第14页 |
| ·COR（cold responsive genes 冷调节基因） | 第14-15页 |
| ·非依赖 CBF 途径 | 第15页 |
| ·参与低温响应途径的基因 | 第15-18页 |
| ·CBF 类基因（CBF/DREB1） | 第15-17页 |
| ·DREB2 类基因 | 第17-18页 |
| ·其他低温响应基因 | 第18页 |
| ·低温逆境响应与其他非生物逆境之间的关系 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 EgrCT 和 EgrDREB2A 基因的生物信息学分析和亚细胞定位 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料，试剂和实验仪器 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·EgrCT 和 EgrDREB2A 生物信息学分析 | 第21页 |
| ·启动子顺式作用元件的分析 | 第21页 |
| ·巨桉 EgrCT 和 EgrDREB2A 的亚细胞定位 | 第21-25页 |
| ·sGFP 融合表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第24-25页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-31页 |
| ·EgrCT 基因的生物信息学分析 | 第25-27页 |
| ·EgrCT 基因启动子顺式作用元件分析 | 第27-28页 |
| ·EgrDREB2A 基因的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| ·EgrDREB2A 基因启动子顺式作用元件分析 | 第29-30页 |
| ·EgrCT::sGFP 和 EgrDREB2A::sGFP 融合表达载体的构建及表达 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·对 EgrCT 基因生物信息学分析及亚细胞定位的讨论 | 第31-32页 |
| ·对 EgrDREB2A 基因生物信息学分析及亚细胞定位的讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 巨桉 EgrCT 和 EgrDREB2A 的表达分析 | 第33-44页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·试剂和仪器 | 第33页 |
| ·材料的处理 | 第33页 |
| ·巨桉总 RNA 的提取以及检测 | 第33-35页 |
| ·巨桉总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 RNA | 第34-35页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第35页 |
| ·荧光定量引物的设计以及引物扩增效率的分析 | 第35-36页 |
| ·EgrCT 和 EgrDREB2A 的基因组织特异性表达分析 | 第36页 |
| ·低温处理 | 第36页 |
| ·昼夜节律、盐胁迫和 ABA 处理 | 第36-37页 |
| ·胁迫以及昼夜节律基因的定量表达-实时荧光定量 RT-PCR | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·EgrCT 和 EgrDREB2A 基因荧光定量引物扩增效率的分析 | 第37-38页 |
| ·EgrCT 基因的表达分析 | 第38-40页 |
| ·EgrCT 基因的组织特异性表达分析 | 第38页 |
| ·EgrCT 基因的胁迫响应表达分析 | 第38页 |
| ·昼夜节奏、盐胁迫和 ABA 对 EgrDREB2A 表达影响 | 第38-40页 |
| ·EgrDREB2A 基因的表达分析 | 第40-42页 |
| ·EgrDREB2A 基因的组织特异性表达分析 | 第40页 |
| ·低温条件下 EgrDREB2A 基因的表达分析 | 第40-42页 |
| ·ABA 和 NaCl、昼夜节奏对 EgrDREB2A 表达影响 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·对 EgrCT 基因的表达分析讨论 | 第42-43页 |
| ·对 EgrDREB2A 基因的表达分析讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 巨桉 EgrCT 基因转录激活功能检测 | 第44-50页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·菌株与质粒 | 第44页 |
| ·试剂和实验所用培养基 | 第44页 |
| ·酵母中表达的效应质粒 pGBKT7-EgrCT 的构建 | 第44-45页 |
| ·酵母感受态细胞的制备以及转化 | 第45-46页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| ·质粒转化酵母细胞 | 第46页 |
| ·酵母双杂交 | 第46-47页 |
| ·转化 | 第46页 |
| ·Y2H[pGBKT7-EgrCT]×Y187[pGADT7-T] | 第46页 |
| ·Y2H[pGBKT7-53]×Y187[pGADT7-T] | 第46-47页 |
| ·Y2H[pGBKT7-Lam]×Y187[pGADT7-T] | 第47页 |
| ·筛选 | 第47页 |
| ·自激活检测 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-49页 |
| ·酵母中表达的效应质粒 pGBKT7-EgrCT 的构建 | 第47-48页 |
| ·EgrCT-pGBKT7 的酵母转化 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 巨桉 EgrCT 基因和 EgrDREB2A 基因超表达载体的拟南芥转化 | 第50-56页 |
| ·材料与方法 | 第50页 |
| ·植物材料和菌株及载体 | 第50页 |
| ·试验中所用试剂，药品和培养基 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·EgrCT：：35S 和 EgrDREB2A::35S 超表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·引物设计与合成（载体构建流程如图 5.1 所示） | 第50页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·植物表达载体电击转化农杆菌 | 第51-52页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第52-53页 |
| ·拟南芥的培养 | 第52-53页 |
| ·农杆菌的培养和转基因前的准备 | 第53页 |
| ·浸润法转基因 | 第53页 |
| ·拟南芥阳性植株的筛选鉴定 | 第53-54页 |
| ·转基因阳性拟南芥的筛选-潮霉素抗性的筛选 | 第53页 |
| ·拟南芥转基因苗的检测 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-55页 |
| ·EgrCT::35S 和 EgrDREB2A::35S 超表达载体的构建 | 第54页 |
| ·转基因拟南芥的筛选验证 | 第54-55页 |
| ·转基因拟南芥的潮霉素筛选 | 第54页 |
| ·转基因植株目的基因转化的鉴定 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第六章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 个人简介及论文发表情况和社会实践及学术交流活动 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
