摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
縮略词 | 第14-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一部分 孕期苯并[A]芘暴露模型的建立 | 第17-30页 |
1 材料 | 第17-18页 |
·动物 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·染毒所需试剂 | 第17页 |
·血清苯并[a]芘检测所需试剂 | 第17页 |
·仪器 | 第17-18页 |
2 方法 | 第18-24页 |
·孕鼠苯并[a]芘染毒模型的建立 | 第18-19页 |
·苯并[a]芘溶液的配制 | 第18页 |
·动物分组及染毒 | 第18-19页 |
·饲养条件 | 第18页 |
·实验动物分组 | 第18-19页 |
·生长发育指标的检测 | 第19页 |
·孕鼠体重的测量 | 第19页 |
·仔鼠体重、身长、尾长的测量 | 第19页 |
·血清苯并[a]芘的检测 | 第19-24页 |
·试剂的配制 | 第19-20页 |
·空白基质 | 第19页 |
·流动相溶液配制 | 第19页 |
·标准溶液的配制标准溶液储备液 | 第19-20页 |
·质控样品的配制 | 第20页 |
·血清苯并[a]芘的检测方法 | 第20-24页 |
·样品制备过程 | 第20-21页 |
·分析条件 | 第21页 |
·结果计算 | 第21-22页 |
·随行标准曲线 | 第22页 |
·随行质控样品测定结果 | 第22页 |
·色谱图 | 第22-24页 |
3 数据处理和统计学检验 | 第24-25页 |
4. 结果 | 第25-27页 |
·孕鼠体重及仔鼠生长发育指标的检测 | 第25-26页 |
·血清中苯并[a]芘浓度的检测结果 | 第26-27页 |
5. 讨论 | 第27-30页 |
第二部分 孕期苯并[a]芘暴露后仔鼠肝细胞基因表达水平研究 | 第30-54页 |
1. 材料 | 第31页 |
·大鼠全基因组芯片 | 第31页 |
·基因芯片检测所需试剂/试剂盒 | 第31页 |
·基因芯片扫描所需仪器 | 第31页 |
2. 基因芯片检测方法 | 第31-35页 |
·RNA抽提 | 第32页 |
·RNA质检 | 第32页 |
·样本标记与杂交 | 第32-35页 |
·基因芯片扫描筛选差异表达的基因 | 第35页 |
3. 数据处理机统计分析方法 | 第35-37页 |
·差异基因的基因功能分析 | 第35页 |
·差异基因的显著性基因表达趋势分析 | 第35页 |
·差异基因涉及的信号通路显著性分析 | 第35-36页 |
·差异基因整体作用网络的构建 | 第36-37页 |
4. 结果 | 第37-48页 |
·基因芯片扫描筛选差异表达的基因及功能分析 | 第37-39页 |
·差异基因的显著性表达趋势分析 | 第39-43页 |
·差异基因涉及的信号转导通路分析 | 第43-47页 |
·差异基因整体作用网络构建 | 第47-48页 |
5. 讨论 | 第48-54页 |
·整体网络中的核心基因及通路的分析与讨论 | 第48-52页 |
·以Cyp2c13为核心基因的代谢通路 | 第50-51页 |
·以Rela和Bcl211为核心的凋亡通路 | 第51-52页 |
·以Plcg1和Mapk8为核心的生长发育通路 | 第52页 |
·原癌基因的分析与讨论 | 第52-54页 |
第三部分 实时定量PCR对基因芯片检测结果的验证 | 第54-60页 |
1. 材料 | 第54-55页 |
·Realtime PCR所需试剂 | 第54-55页 |
·Realtime PCR所需仪器 | 第55页 |
2 方法 | 第55-58页 |
·Realtime PCR所需试剂的配制方法 | 第55-56页 |
·RNA提取所需试剂的配制 | 第55-56页 |
·甲醛变性胶电泳所需试剂的配制 | 第56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·RNA提取 | 第56-57页 |
·RNA反转录 | 第57页 |
·Realtime-PCR反应 | 第57-58页 |
3 数据处理和统计学检验 | 第58页 |
4 结果 | 第58-59页 |
5. 讨论 | 第59-60页 |
第四部分 孕期苯并[A]芘暴露对仔鼠肝细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响 | 第60-67页 |
1. 材料 | 第60-61页 |
·Western blot所需试剂 | 第60页 |
·蛋白定量和Western blot所需仪器 | 第60-61页 |
2. 方法 | 第61-63页 |
·蛋白定量和Western blot检测所需试剂的配制方法 | 第61页 |
·蛋白定量和Western blot检测 | 第61-63页 |
·裂解细胞提取总蛋白 | 第61页 |
·蛋白质定量 | 第61-62页 |
·Western blot分析 | 第62-63页 |
3 数据处理和统计学检验 | 第63页 |
4. 结果 | 第63-64页 |
5. 讨论 | 第64-67页 |
创新点 | 第67-68页 |
问题与展望 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
综述 | 第75-82页 |
参考文献 | 第80-82页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
个人简历 | 第84页 |