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大鼠孕期苯并[a]芘暴露对仔鼠肝细胞全基因组基因表达影响的研究

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
縮略词第14-15页
前言第15-17页
第一部分 孕期苯并[A]芘暴露模型的建立第17-30页
 1 材料第17-18页
   ·动物第17页
   ·试剂第17页
     ·染毒所需试剂第17页
     ·血清苯并[a]芘检测所需试剂第17页
   ·仪器第17-18页
 2 方法第18-24页
   ·孕鼠苯并[a]芘染毒模型的建立第18-19页
     ·苯并[a]芘溶液的配制第18页
     ·动物分组及染毒第18-19页
       ·饲养条件第18页
       ·实验动物分组第18-19页
   ·生长发育指标的检测第19页
     ·孕鼠体重的测量第19页
     ·仔鼠体重、身长、尾长的测量第19页
   ·血清苯并[a]芘的检测第19-24页
     ·试剂的配制第19-20页
       ·空白基质第19页
       ·流动相溶液配制第19页
       ·标准溶液的配制标准溶液储备液第19-20页
       ·质控样品的配制第20页
     ·血清苯并[a]芘的检测方法第20-24页
       ·样品制备过程第20-21页
       ·分析条件第21页
       ·结果计算第21-22页
       ·随行标准曲线第22页
       ·随行质控样品测定结果第22页
       ·色谱图第22-24页
 3 数据处理和统计学检验第24-25页
 4. 结果第25-27页
   ·孕鼠体重及仔鼠生长发育指标的检测第25-26页
   ·血清中苯并[a]芘浓度的检测结果第26-27页
 5. 讨论第27-30页
第二部分 孕期苯并[a]芘暴露后仔鼠肝细胞基因表达水平研究第30-54页
 1. 材料第31页
   ·大鼠全基因组芯片第31页
   ·基因芯片检测所需试剂/试剂盒第31页
   ·基因芯片扫描所需仪器第31页
 2. 基因芯片检测方法第31-35页
   ·RNA抽提第32页
   ·RNA质检第32页
   ·样本标记与杂交第32-35页
   ·基因芯片扫描筛选差异表达的基因第35页
 3. 数据处理机统计分析方法第35-37页
   ·差异基因的基因功能分析第35页
   ·差异基因的显著性基因表达趋势分析第35页
   ·差异基因涉及的信号通路显著性分析第35-36页
   ·差异基因整体作用网络的构建第36-37页
 4. 结果第37-48页
   ·基因芯片扫描筛选差异表达的基因及功能分析第37-39页
   ·差异基因的显著性表达趋势分析第39-43页
   ·差异基因涉及的信号转导通路分析第43-47页
   ·差异基因整体作用网络构建第47-48页
 5. 讨论第48-54页
   ·整体网络中的核心基因及通路的分析与讨论第48-52页
     ·以Cyp2c13为核心基因的代谢通路第50-51页
     ·以Rela和Bcl211为核心的凋亡通路第51-52页
     ·以Plcg1和Mapk8为核心的生长发育通路第52页
   ·原癌基因的分析与讨论第52-54页
第三部分 实时定量PCR对基因芯片检测结果的验证第54-60页
 1. 材料第54-55页
   ·Realtime PCR所需试剂第54-55页
     ·Realtime PCR所需仪器第55页
 2 方法第55-58页
   ·Realtime PCR所需试剂的配制方法第55-56页
     ·RNA提取所需试剂的配制第55-56页
     ·甲醛变性胶电泳所需试剂的配制第56页
   ·方法第56-58页
     ·RNA提取第56-57页
     ·RNA反转录第57页
     ·Realtime-PCR反应第57-58页
 3 数据处理和统计学检验第58页
 4 结果第58-59页
 5. 讨论第59-60页
第四部分 孕期苯并[A]芘暴露对仔鼠肝细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响第60-67页
 1. 材料第60-61页
   ·Western blot所需试剂第60页
   ·蛋白定量和Western blot所需仪器第60-61页
 2. 方法第61-63页
   ·蛋白定量和Western blot检测所需试剂的配制方法第61页
   ·蛋白定量和Western blot检测第61-63页
     ·裂解细胞提取总蛋白第61页
     ·蛋白质定量第61-62页
     ·Western blot分析第62-63页
 3 数据处理和统计学检验第63页
 4. 结果第63-64页
 5. 讨论第64-67页
创新点第67-68页
问题与展望第68-69页
结论第69-70页
参考文献第70-75页
综述第75-82页
 参考文献第80-82页
攻读学位期间发表文章情况第82-83页
致谢第83-84页
个人简历第84页

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