| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-28页 |
| 第一部分： 天南星科植物病毒的研究进展 | 第16-22页 |
| 1．1 天南星科植物的起源与分布 | 第16页 |
| 1．2 天南星科植物病毒的研究进展 | 第16-20页 |
| 1．3 芋花叶病毒的生物学特征 | 第20-21页 |
| 1．4 2种天南星科作物芋和半夏 | 第21-22页 |
| 第二部分： 植物脱毒组培的研究进展 | 第22-28页 |
| 1．5 病毒侵染对无性繁殖作物的危害 | 第22页 |
| 1．6 脱毒苗获得的方法学 | 第22-24页 |
| 1．6．1 热处理脱毒法 | 第22页 |
| 1．6．2 愈伤组织培养法 | 第22-23页 |
| 1．6．3 原生质体培养法 | 第23页 |
| 1．6．4 珠心胚培养法 | 第23页 |
| 1．6．5 花药培养法 | 第23页 |
| 1．6．6 茎尖分生组织培养法 | 第23-24页 |
| 1．7 植物病毒检测的方法学及其进展 | 第24-27页 |
| 1．7．1 目测法 | 第24页 |
| 1．7．2 指示植物鉴别法 | 第24页 |
| 1．7．3 电镜观察方法 | 第24页 |
| 1．7．4 血清学方法 | 第24-25页 |
| 1．7．4．1 酶联免疫吸附法 | 第24-25页 |
| 1．7．4．2 斑点免疫结合测定法 | 第25页 |
| 1．7．4．3 其它免疫学方法 | 第25页 |
| 1．7．5 分子生物学方法 | 第25-27页 |
| 1．7．5．1 PCR和RT-PCR检测技术 | 第25-26页 |
| 1．7．5．2 dsRNA检测技术 | 第26页 |
| 1．7．5．3 核酸杂交检测技术 | 第26页 |
| 1．7．5．4 PCR微量板杂交法 | 第26-27页 |
| 1．8 拟研究内容和目标 | 第27-28页 |
| 1．8．1 研究内容 | 第27页 |
| 1．8．2 预期目标 | 第27-28页 |
| 第二章 天南星科植物病毒的多样性研究 | 第28-45页 |
| 2．1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2．1．1 毒源采集与保存 | 第28页 |
| 2．1．2 病毒双链RNA提取与病毒基因组分分析 | 第28-29页 |
| 2．1．3 病毒提纯 | 第29页 |
| 2．1．4 病毒形态学与组织病变观察 | 第29-30页 |
| 2．1．4．1 提纯病毒粒子的观察 | 第29页 |
| 2．1．4．2 感病植物的组织病变观察 | 第29-30页 |
| 2．1．5 DNA模板的制备 | 第30页 |
| 2．1．6 植物总RNA的提取 | 第30页 |
| 2．1．7 RNA样品的变性和点样 | 第30-31页 |
| 2．1．8 杂交反应 | 第31页 |
| 2．1．8．1 预杂交 | 第31页 |
| 2．1．8．2 ~（32）P标记DNA探针的制备 | 第31页 |
| 2．1．8．3 杂交反应和洗膜 | 第31页 |
| 2．1．9 脱探针和二次杂交 | 第31-32页 |
| 2．2 结果与分析 | 第32-43页 |
| 2．2．1 天南星科植物病毒的杂交检测结果 | 第32-36页 |
| 2．2．1．1 探针模板的制备 | 第32-33页 |
| 2．2．1．2 湖南省天南星科植物病毒检测结果 | 第33-34页 |
| 2．2．1．3 海南省天南星科作物病毒检测结果 | 第34-35页 |
| 2．2．1．4 浙江省天南星科作物病毒检测结果 | 第35-36页 |
| 2．2．2 侵染天南星科植物的主要病毒及分布规律 | 第36-43页 |
| 2．2．2．1 天南星科各属作物病毒的检测结果 | 第39-42页 |
| 2．2．2．2 天南星科植物病毒不同地点的发生情况 | 第42页 |
| 2．2．2．3 天南星科芋属作物病毒的发生情况 | 第42-43页 |
| 2．2．2．4 浙江省芋属作物病毒的发生情况 | 第43页 |
| 2．3 小结与讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 芋花叶病毒3′-末端序列的分子克隆和差异分析 | 第45-62页 |
| 3．1 材料和方法 | 第45-50页 |
| 3．1．1 病毒分离物 | 第45页 |
| 3．1．2 酶与试剂 | 第45页 |
| 3．1．3 引物设计 | 第45-46页 |
| 3．1．4 病毒RNA模板的制备 | 第46页 |
| 3．1．4．1 植物组织中病毒吸附法 | 第46页 |
| 3．1．4．2 用双链RNA制备模板 | 第46页 |
| 3．1．5 RT-PCR和cDNA合成 | 第46-47页 |
| 3．1．6 PCR反应和目标片段的扩增 | 第47页 |
| 3．1．7 PCR产物回收 | 第47-48页 |
| 3．1．7．1 试剂盒方法回收 | 第47页 |
| 3．1．7．2 低融点胶回收 | 第47-48页 |
| 3．1．8 DNA片段的连接 | 第48页 |
| 3．1．9 感受态细胞的制备 | 第48页 |
| 3．1．10 重组质粒的转化 | 第48-49页 |
| 3．1．11 重组质粒DNA的制备（碱裂解法） | 第49页 |
| 3．1．12 重组质粒的鉴定 | 第49页 |
| 3．1．12．1 重组质粒的酶切鉴定 | 第49页 |
| 3．1．12．2 重组质粒的PCR鉴定 | 第49页 |
| 3．1．13 DNA测序和序列同源性比较 | 第49-50页 |
| 3．2 结果分析 | 第50-61页 |
| 3．2．1 DsMV3′-末端序列的cDNA的克隆 | 第50-51页 |
| 3．2．2 不同DsMV分离物的序列分析 | 第51页 |
| 3．2．3 不同DsMV分离物CP核苷酸序列同源性比较 | 第51-56页 |
| 3．2．4 不同DsMV分离物CP氨基酸序列同源性比较 | 第56-58页 |
| 3．2．5 不同DsMV分离物3′-UTR核苷酸序列同源性比较 | 第58-61页 |
| 3．3 小结与讨论 | 第61-62页 |
| 第四章 芋和掌叶半夏的脱毒培养研究 | 第62-74页 |
| 4．1 材料与方法 | 第62-65页 |
| 4．1．1 芋的组织培养 | 第62-64页 |
| 4．1．1．1 实验材料 | 第62页 |
| 4．1．1．2 三十烷醇乳剂的配制 | 第62页 |
| 4．1．1．3 培养基的配制 | 第62-63页 |
| 4．1．1．4 预处理 | 第63页 |
| 4．1．1．5 幼芽和茎尖组织培养 | 第63页 |
| 4．1．1．6 继代培养和快速繁殖 | 第63页 |
| 4．1．1．7 生根和炼苗 | 第63-64页 |
| 4．1．2 掌叶半夏的组织培养 | 第64页 |
| 4．1．3 TA对芋再生苗生长的影响 | 第64页 |
| 4．1．4 芋再生苗病毒检测 | 第64-65页 |
| 4．1．4．1 DNA模板的制备 | 第64页 |
| 4．1．4．2 植物总RNA的提取 | 第64页 |
| 4．1．4．3 RNA样品的变性和点样 | 第64页 |
| 4．1．4．4 杂交反应 | 第64页 |
| 4．1．4．5 脱探针和二次杂交 | 第64-65页 |
| 4．2 结果与分析 | 第65-73页 |
| 4．2．1 芋组培苗的获得 | 第65-67页 |
| 4．2．2 掌叶半夏组培苗的获得 | 第67页 |
| 4．2．3 TA处理对芋再生苗生长的影响 | 第67-70页 |
| 4．2．3．1 TA处理对芋再生苗株高的影响 | 第67-68页 |
| 4．2．3．2 TA处理对芋再生苗最大根长的影响 | 第68页 |
| 4．2．3．3 TA处理对芋再生苗根数的影响 | 第68-69页 |
| 4．2．3．4 TA处理对芋再生苗鲜重的影响 | 第69-70页 |
| 4．2．4 点杂交方法检测DsMV灵敏度的测定 | 第70页 |
| 4．2．5 马梗芋脱毒苗的获得 | 第70-72页 |
| 4．2．6 奉化芋艿头脱毒苗的获得 | 第72-73页 |
| 4．3 小结与讨论 | 第73-74页 |
| 附件1： 溶液的配制 | 第74页 |
| 附件2： 研钵和RNA提取器械的处理 | 第74-75页 |
| 附件3： MS培养基母液的配制 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
