| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-27页 |
| ·微拟球藻的概述 | 第13-20页 |
| ·微拟球藻的简介 | 第13页 |
| ·微拟球藻脂肪酸合成途径的概述 | 第13-16页 |
| ·脂肪酸从头合成的过程 | 第13-16页 |
| ·三酰甘油的生物合成 | 第16页 |
| ·微拟球藻脂肪酸合成途径中几种重要酶的简介 | 第16-20页 |
| ·乙酰辅酶A合成酶的概述 | 第16-18页 |
| ·酰基辅酶A合成酶的概述 | 第18-19页 |
| ·二酰基甘油酰基转移酶的概述 | 第19-20页 |
| ·生物柴油的概述 | 第20-24页 |
| ·生物柴油的简介 | 第20-21页 |
| ·生物柴油的优点 | 第21页 |
| ·生物柴油的生产方法 | 第21-23页 |
| ·化学法生产 | 第21-22页 |
| ·生物酶合成法 | 第22-23页 |
| ·“工程微藻”法 | 第23页 |
| ·生物柴油的研究现状 | 第23-24页 |
| ·转录因子的概述 | 第24-26页 |
| ·转录因子的简介 | 第24页 |
| ·转录因子的研究现状 | 第24-26页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-37页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·微拟球藻材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·微拟球藻的培养 | 第28页 |
| ·微拟球藻RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·微拟球藻cDNA第一链的合成 | 第29页 |
| ·微拟球藻脂酰辅酶A合成酶基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·酶切 | 第30页 |
| ·胶回收 | 第30-31页 |
| ·连接T载体 | 第31页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
| ·筛选阳性克隆及测序 | 第32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32页 |
| ·连接 | 第32-33页 |
| ·转化、鉴定及测序 | 第33页 |
| ·质粒提取 | 第33页 |
| ·酶切鉴定 | 第33页 |
| ·酵母感受态的制备 | 第33-34页 |
| ·酵母转化 | 第34页 |
| ·重组酵母的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·酵母总脂含量与脂肪酸组成的测定 | 第35页 |
| ·不同环境条件处理微拟球藻 | 第35-36页 |
| ·荧光定量PCR反应 | 第36页 |
| ·尼罗红法测定酵母中性脂 | 第36页 |
| ·酵母蓝光照射实验 | 第36-37页 |
| 3 结果分析与讨论 | 第37-57页 |
| ·微拟球藻脂酰辅酶A合成酶基因的克隆 | 第37-41页 |
| ·微拟球藻总的RNA提取结果 | 第37页 |
| ·微拟球藻脂酰辅酶A合成酶基因全长的获得与生物信息学分析 | 第37-41页 |
| ·酵母重组表达载体pYLACS的构建 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pYLACS的酵母表达及其对脂肪酸代谢的影响 | 第42-45页 |
| ·NgLACS基因对酵母油脂总量的影响 | 第42-43页 |
| ·NgLACS基因对酵母脂肪酸组成的影响 | 第43-45页 |
| ·不同氮浓度、温度和Fe~(3+)浓度对NgLACS基因转录水平的影响 | 第45-47页 |
| ·不同氮浓度对NgLACS基因转录水平的影响 | 第45页 |
| ·不同温度对NgLACS基因转录水平的影响 | 第45-46页 |
| ·不同Fe~(3+)浓度对NgLACS基因转录水平的影响 | 第46-47页 |
| ·不同氮浓度、温度和Fe~(3+)浓度对微拟球藻脂酰辅酶A组成的影响 | 第47-48页 |
| ·微拟球藻AUREOCHROME基因的克隆及生物信息学分析 | 第48-52页 |
| ·酵母重组表达载体pYAUREO1的构建 | 第52页 |
| ·重组质粒pYAURE01的酵母表达及其对脂肪酸代谢的影响 | 第52-54页 |
| ·NgAUREO1对酵母中脂肪酸代谢相关基因的转录水平的影响 | 第54-55页 |
| ·蓝光调控重组酵母的脂肪酸代谢 | 第55-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |
