| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·花器官衰老的生理学与分子生物学 | 第10-15页 |
| ·花器官衰老的生理变化 | 第10-12页 |
| ·花器官衰老的分子生物学 | 第12-15页 |
| ·兰花切花衰老的研究进展 | 第15-18页 |
| ·兰花花器官的生长发育 | 第16页 |
| ·兰花花器官的衰老 | 第16-18页 |
| ·RACE技术在植物基因克隆上的应用 | 第18-20页 |
| ·获得全长cDNA的方法 | 第18页 |
| ·RACE技术 | 第18-19页 |
| ·RACE在植物基因研究上的应用 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的意义及主要内容 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20页 |
| ·本研究的主要内容 | 第20-21页 |
| ·本研究的技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-40页 |
| ·材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·质粒及菌株 | 第22页 |
| ·生化试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·方法与步骤 | 第23-40页 |
| ·文心兰RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第24页 |
| ·目的基因cDNA片段的获得 | 第24-28页 |
| ·3'-RACE扩增OnACS1和OnACO1基因的3'端 | 第28-30页 |
| ·5'-RACE扩增OnACS1和OnACO1基因的5'端 | 第30-34页 |
| ·全长cDNA的PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的原核表达 | 第35-37页 |
| ·融合蛋白的活性检测 | 第37-38页 |
| ·OnACS1和OnACO1的RT-PCR表达分析 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-49页 |
| ·文心兰总RNA的提取结果 | 第40页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的克隆 | 第40-42页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因中间序列的获得 | 第40页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因3'端、5'端序列的扩增 | 第40-41页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因全长序列的扩增 | 第41-42页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的生物信息学分析 | 第42-45页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的原核表达 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·原核表达分析 | 第46页 |
| ·重组OnACS1蛋白和OnACO1蛋白的活性检测 | 第46-47页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的表达分析 | 第47-49页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因在不同组织中的表达 | 第47页 |
| ·乙烯利处理对OnACS1和OnACO1基因的表达影响 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·文心兰处理与取材 | 第49页 |
| ·RNA的提取效果 | 第49页 |
| ·影响全长cDNA扩增成功的因素 | 第49-50页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的序列分析 | 第50页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的表达分析 | 第50-51页 |
| ·OnACS1和OnACO1基因的原核表达 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录一：有关试剂的配制 | 第58-59页 |
| 附录二：缩写词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
