百脉根LjZFP3基因在根瘤发育中的功能研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 縮略语表 | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第9-22页 |
| ·生物固氮的意义 | 第9页 |
| ·生物固氮的种类 | 第9-10页 |
| ·根瘤菌与豆科植物共生固氮系统 | 第10-15页 |
| ·根瘤菌的入侵 | 第10-13页 |
| ·结瘤信号的传导 | 第13-14页 |
| ·转录因子的调控 | 第14-15页 |
| ·锌指蛋白 | 第15-21页 |
| ·锌指蛋白的研究进展 | 第15页 |
| ·锌指蛋白的分类 | 第15-16页 |
| ·植物C_2H_2型锌指蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| ·植物C_2H_2型锌指蛋白的功能研究 | 第17-19页 |
| ·植物体根及根瘤发育相关锌指蛋白的研究 | 第19-21页 |
| ·研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第22-40页 |
| ·材料 | 第22-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第23-24页 |
| ·分子生物学和植物转化相关试剂 | 第24页 |
| ·主要的培养基及缓冲液 | 第24-27页 |
| ·分子生物学试剂 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-40页 |
| ·基本分子生物学操作方法 | 第27页 |
| ·候选基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·CTAB法提取百脉根基因组总DNA | 第28页 |
| ·酵母双杂交验证蛋白相互作用 | 第28-33页 |
| ·表达分析 | 第33-35页 |
| ·启动子分析 | 第35页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第35-36页 |
| ·超表达载体的构建 | 第36页 |
| ·百脉根稳定转化 | 第36-38页 |
| ·百脉根毛根转化 | 第38-39页 |
| ·根瘤菌接种 | 第39页 |
| ·转基因植株结瘤数目的统计 | 第39页 |
| ·侵入线的观察 | 第39页 |
| ·异源蛋白在植物细胞中的瞬间表达及检测 | 第39-40页 |
| 3. 结果与分析 | 第40-51页 |
| ·ZFP3基因序列分析 | 第40-41页 |
| ·ZFP3在百脉根中的表达特征 | 第41-44页 |
| ·ZFP3蛋白的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| ·百脉根中ZFP3的超量表达 | 第45-46页 |
| ·百脉根中ZFP3的基因沉默 | 第46-47页 |
| ·百脉根中ZFP3的突变体表型 | 第47-51页 |
| ·突变体分析 | 第47-48页 |
| ·突变体的筛选及验证 | 第48-49页 |
| ·突变体表型的验证 | 第49-51页 |
| 4. 结果与讨论 | 第51-53页 |
| ·总结 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 5. 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录一:本研究所用引物 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |