| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·生物固氮 | 第9页 |
| ·根瘤菌-豆科植物共生固氮体系 | 第9-14页 |
| ·根瘤形成及根瘤类型 | 第9-12页 |
| ·与共生固氮有关的根瘤菌基因 | 第12-13页 |
| ·与共生固氮有关的植物基因 | 第13-14页 |
| ·脂质转移蛋白 | 第14-16页 |
| ·DnaJ蛋白 | 第16-18页 |
| ·研究目的和意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·实验材料 | 第20-27页 |
| ·质粒与菌株 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21-23页 |
| ·缓冲液及反应试剂 | 第23-25页 |
| ·引物序列 | 第25-27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·分子生物学基本操作 | 第27-29页 |
| ·RT-PCR | 第29-30页 |
| ·酵母感受态制备及酵母转化 | 第30-31页 |
| ·酵母小范围mating | 第31页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性检测 | 第31-32页 |
| ·蛋白小量诱导表达 | 第32页 |
| ·Pull-down和Western blot | 第32-34页 |
| ·BIFC | 第34页 |
| ·植物细胞组织培养 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-54页 |
| ·紫云英AsDJL1基因的全长cDNA扩增和生物信息学分析 | 第36-39页 |
| ·AsDJLl基因截短突变体的构建 | 第39-40页 |
| ·紫云英AsE246与AsDJLl互作区域的验证 | 第40-41页 |
| ·体外确证AsE246与AsDJLl蛋白相互作用 | 第41-44页 |
| ·AsE246蛋白的体外表达及纯化 | 第41-42页 |
| ·AsDJL1蛋白的体外表达及纯化 | 第42-43页 |
| ·pull-down及western blot | 第43-44页 |
| ·AsE246与AsDJL1在烟草细胞内的相互作用 | 第44-46页 |
| ·紫云英中AsDJL1基因的超量表达 | 第46-49页 |
| ·基因AsDJL1超表达载体的构建 | 第46页 |
| ·AsDJL1基因超量表达植株的共生表型 | 第46-49页 |
| ·紫云英中AsDJL1的基因沉默 | 第49-54页 |
| ·基因AsDJL1沉默载体的构建 | 第49-50页 |
| ·AsDJL1基因沉默植株的共生表型 | 第50-54页 |
| 4 小结与讨论 | 第54-58页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·进一步研究设想 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |