| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-30页 |
| 第一节 炎症与肿瘤 | 第15-20页 |
| ·肿瘤组织对巨噬细胞的招募 | 第15-16页 |
| ·趋化因子参与肿瘤对巨噬细胞的招募 | 第16-17页 |
| ·肿瘤生长过程中肿瘤相关巨噬细胞的作用 | 第17-18页 |
| ·M1型肿瘤相关巨噬细胞激活抗肿瘤免疫反应 | 第18页 |
| ·M2巨噬细胞刺激肿瘤生长 | 第18页 |
| ·肿瘤相关M2巨噬细胞和转移 | 第18-19页 |
| ·肿瘤相关巨噬细胞的血管新生表型 | 第19-20页 |
| 第二节 肿瘤相关巨噬细胞与乳腺癌 | 第20-26页 |
| ·巨噬细胞参与乳腺癌进程的证据 | 第20-22页 |
| ·小鼠模型：巨噬细胞和肿瘤细胞之间相互作用 | 第22页 |
| ·乳腺巨噬细胞在青春期和哺乳期的发展 | 第22-23页 |
| ·退化的乳腺 | 第23-24页 |
| ·乳腺癌 | 第24页 |
| ·肿瘤相关巨噬细胞作为潜在治疗靶标 | 第24-26页 |
| 第三节 miRNA与肿瘤 | 第26-28页 |
| ·miRNAs | 第26-27页 |
| ·人类恶性肿瘤的miRNAs变化 | 第27页 |
| ·miRNA变化可能导致肿瘤易发 | 第27-28页 |
| ·miRNA作为原癌基因及抑癌基因 | 第28页 |
| 第四节 本课题的假设和研究目的及意义 | 第28-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-59页 |
| 第一节 仪器设备 | 第30-31页 |
| 第二节 菌株、细胞系、载体和肿瘤标本 | 第31页 |
| ·菌株 | 第31页 |
| ·细胞系 | 第31页 |
| ·载体 | 第31页 |
| ·肿瘤标本 | 第31页 |
| 第三节 实验试剂 | 第31-33页 |
| ·生物酶试剂 | 第31-32页 |
| ·培养基和抗生素 | 第32页 |
| ·分子生物学实验试剂盒 | 第32页 |
| ·电泳试剂 | 第32页 |
| ·RT-PCR相关试剂 | 第32-33页 |
| ·抗体及转染试剂 | 第33页 |
| ·其它试剂 | 第33页 |
| 第四节 相关实验试剂的配制 | 第33-36页 |
| ·细胞培养基和有关溶液 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌培养基的配制 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE溶液配制 | 第34-35页 |
| ·DNA电泳琼脂糖凝胶配制 | 第35页 |
| ·免疫组化实验相关试剂 | 第35页 |
| ·Western Blotting相关溶液 | 第35-36页 |
| 第五节 实验方法 | 第36-59页 |
| ·细胞培养 | 第36-37页 |
| ·Western Blot | 第37-40页 |
| ·RT-PCR和Real-time PCR | 第40-43页 |
| ·免疫组化和免疫荧光 | 第43-46页 |
| ·细胞转染 | 第46-47页 |
| ·小鼠原代巨噬细胞的提取 | 第47页 |
| ·细胞侵袭和划痕实验 | 第47-48页 |
| ·细胞刺激实验 | 第48-49页 |
| ·蛋白芯片分析实验 | 第49-50页 |
| ·双荧光报告质粒的构建 | 第50-52页 |
| ·双荧光报告分析实验 | 第52页 |
| ·miRNA原位杂交 | 第52-55页 |
| ·免疫磁珠分离肿瘤相关巨噬细胞和脾脏巨噬细胞 | 第55-56页 |
| ·双荧光报告检测信号通路活性 | 第56-59页 |
| 第三章 实验结果 | 第59-81页 |
| 第一节 在肿瘤细胞培养液上清刺激下肿瘤相关巨噬细胞miRNA表达谱的变化 | 第59-63页 |
| ·Fra-1 3’UTR区结合miRNA的预测 | 第59页 |
| ·肿瘤相关巨噬细胞miRNA表达谱的变化 | 第59-60页 |
| ·MDA-MB-231乳腺癌细胞培养液上清抑制U937细胞miR-19a的表达 | 第60-61页 |
| ·肿瘤相关巨噬细胞和脾脏巨噬细胞miR-19a-3p的表达 | 第61页 |
| ·乳腺癌细胞培养液上清刺激巨噬细胞Fra-1的表达 | 第61-63页 |
| 第二节 miR-19a-3p对Fra-1及其下游基因的调节 | 第63-68页 |
| ·miRNA对RAW264.7细胞中Fra-1表达的调节 | 第63-64页 |
| ·miR-19a-3p对原代巨噬细胞和U937细胞Fra-1表达的调节 | 第64页 |
| ·双荧光报告系统分析miR-19a-3p对Fra-1 3’UTR区的结合 | 第64-66页 |
| ·miR-19a-3p对Fra-1及其下游基因的调节 | 第66-68页 |
| ·miR-19a-3p对巨噬细胞M2极化相关信号通路的调节 | 第68页 |
| 第三节 miR-19a-3p影响乳腺癌细胞系的侵袭和迁移能力 | 第68-71页 |
| ·miR-19a-3p对乳腺癌细胞系侵袭能力的调节 | 第68-69页 |
| ·miR-19a-3p对乳腺癌细胞系迁移能力的调节 | 第69-71页 |
| 第四节 miR-19a-3p对巨噬细胞表型的调节 | 第71-73页 |
| ·miR-19a-3p对RAW264.7巨噬细胞M1和M2 Marker的调节 | 第71-72页 |
| ·miR-19a-3p对RAW264.7巨噬细胞分泌细胞因子的调节 | 第72-73页 |
| 第五节 miR-19a-3p体内调节乳腺癌的肺转移 | 第73-79页 |
| ·乳腺癌小鼠模型的构建 | 第73-74页 |
| ·miR-19a-3p对M2型肿瘤相关巨噬细胞的调节 | 第74-75页 |
| ·miR-19a-3p对乳腺癌肺生长和转移的调控 | 第75-77页 |
| ·miR-19a-3p在人乳腺癌组织中的分布 | 第77-79页 |
| 第六节 IL-6参与降解巨噬细胞miR-19a-3p的表达 | 第79-81页 |
| 第四章 讨论 | 第81-92页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第92-93页 |
| 第一节 结论 | 第92页 |
| 第二节 创新点 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 综述 | 第106-120页 |
| 参考文献 | 第112-120页 |
| 个人简历 | 第120-121页 |
