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猪小肠NaPi-Ⅱb基因克隆和表达调控研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 引言第16-19页
第二章 无机磷转运机制与NaPi-IIb蛋白第19-43页
 第一节 Pi在动物体内吸收机制第19-20页
 第二节 NaPi-IIb蛋白与NaPi-II型家族第20-23页
 第三节 NaPi-IIb基因分子克隆第23-27页
   ·NaPi-IIb基因的精细结构第24-25页
   ·NaPi-IIb蛋白的理化特性第25-27页
 第四节 NaPi-IIb蛋白分子的调控机制第27-29页
   ·影响NaPi-IIb蛋白表达的因素第27-28页
   ·NaPi-IIb蛋白参与Pi吸收的基因调控网络第28-29页
 第五节 研究目的及技术路线第29-31页
 参考文献第31-43页
第三章 猪小肠NaPi-IIb基因的全长cDNA克隆及生物信息学分析第43-69页
 第一节 RACE技术克隆猪小肠NaPi-IIb基因全长cDNA序列第43-53页
  1 材料与方法第43-48页
   ·材判第43-44页
   ·方法第44-48页
  2 结果与分析第48-51页
   ·猪小肠NaPi-IIb基因片段的RT-PCR第48-50页
   ·5’RACE序列结果第50页
   ·3’RACE序列结果第50-51页
   ·猪小肠NaPi-IIb基因全长cDNA的获得第51页
  3 讨论第51-53页
  4 结论第53页
 第二节 猪小肠NaPi-IIb基因生物信息学分析第53-64页
  1 材料与方法第53-54页
   ·材料第53-54页
   ·方法第54页
  2 结果与分析第54-62页
   ·猪小肠NaPi-IIb基因全长cDNA序列第54-56页
   ·猪NaPi-IIb基因序列同源性比对及分子进化树第56-57页
   ·猪NaPi-IIb基因推导的蛋白基本化学性质第57-58页
   ·猪NaPi-IIb基因推导的蛋白高级结构第58-62页
  3 讨论第62-64页
   ·猪小肠NaPi-IIb基因全长cDNA序列分析第62页
   ·猪NaPi-IIb氨基酸序列同源性比对及分子进化树分析第62-63页
   ·猪NaPi-IIb基因推导的蛋白基本化学性质分析第63页
   ·猪NaPi-IIb基因推导的蛋白高级结构分析第63-64页
  4 结论第64页
 本章小结第64-65页
 参考文献第65-69页
第四章 猪NaPi-IIb基因表达影响因素研究第69-88页
 第一节 小肠不同区段NaPi-IIb基因表达差异研究第69-76页
  1 材料与方法第69-71页
   ·材料第69-70页
   ·方法第70-71页
  2 结果与分析第71-75页
   ·总RNA的提取第71-72页
   ·溶解曲线第72页
   ·扩增曲线第72页
   ·标准曲线第72-74页
   ·小肠不同区段对NaPi-IIb基因转录水平的影响第74-75页
  3 讨论第75页
  4 结论第75-76页
 第二节 雌激素及糖皮质激素对猪小肠上皮细胞NaPi-IIb基因表达的调控第76-84页
  1 材料与方法第76-80页
   ·材料第76-77页
   ·方法第77-80页
  2 结果与分析第80-82页
   ·猪上皮细胞原代培养结果检测第80页
   ·地塞米松干预对上皮细胞NaPi-IIb基因转录的影响第80-81页
   ·雌激素干预对上皮细胞NaPi-IIb基因表达的影响第81-82页
   ·雌激素、地塞米松干预后上皮细胞上清磷离子含量检测第82页
  3 讨论第82-84页
  4 结论第84页
 本章小结第84-85页
 参考文献第85-88页
第五章 雌激素介导的NaPi-IIb基因表达 调控通路研究第88-106页
 第一节 mTOR信号通路对雌激素作用下猪小肠上皮细胞NaPi-IIb基因转录的影响第89-94页
  1 材料与方法第89-91页
   ·材料第89-90页
   ·方法第90-91页
  2 结果与分析第91-93页
   ·PCR扩增产物电泳鉴定第91页
   ·药物干预对猪NaPi-IIb表达的影响第91-93页
  3 讨论第93-94页
  4 结论第94页
 第二节 mTOR信号通路对雌激素作用下猪小肠上皮细胞NaPi-IIb蛋白表达的影响第94-102页
  1 材料与方法第94-97页
   ·材料第94-95页
   ·方法第95-97页
  2 结果与分析第97-100页
   ·药物干预对NaPi-IIb蛋白表达的影响第97-98页
   ·不同浓度雌二醇对mTOR信号通路相关蛋白表达的影响第98页
   ·培养时间对雌二醇介导的mTOR信号通路相关蛋白表达的影响第98-99页
   ·mTOR信号通路相关蛋白与NaPi-IIb蛋白表达量的相关性分析第99-100页
  3 讨论第100-101页
  4 结论第101-102页
 本章小结第102-103页
 参考文献第103-106页
第六章 全文讨论第106-108页
第七章 全文结论第108-109页
第八章 创新点与研究展望第109-110页
附录A第110-111页
附录B第111-113页
附录C第113-115页
附录D第115-116页
附录E第116-117页
附录F第117-119页
附录G第119-120页
附录H第120-127页
附录I第127-128页
作者简历第128-129页
在读期间科研学术成果目录第129-130页
致谢第130页

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