| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-17页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·流感病毒的分类及其基因组的特点 | 第10-12页 |
| ·流感病毒受体特异性 | 第12-13页 |
| ·流感病毒的复制 | 第13-15页 |
| ·禽流感病毒的危害 | 第15-17页 |
| 第二章 （H5N1）和（H3N2）禽流感病毒基因的克隆 | 第17-34页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·病毒与鸡胚 | 第17页 |
| ·细胞系、菌株 | 第17页 |
| ·载体和主要试剂 | 第17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·生物学软件和数据库 | 第18页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-22页 |
| ·病毒RNA的提取及反转录 | 第19-20页 |
| ·病毒的增值与vRNA的提取 | 第19页 |
| ·病毒基因的反转录（RT） | 第19-20页 |
| ·PCR产物克隆 | 第20-22页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第20-21页 |
| ·将目的基因连入pGEM-T载体 | 第21页 |
| ·拼接全长目的基因 | 第21-22页 |
| ·序列比较分析 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-32页 |
| ·RT-PCR扩增PB1、HA（H5N1）和PB1、NA（H3N2）基因 | 第22-25页 |
| ·序列测定 | 第25-30页 |
| ·同源性分析 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 NP-NP 相互作用研究 | 第34-45页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·细胞系、菌株 | 第34页 |
| ·载体和主要试剂 | 第34-35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·NP(H5N1)真核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·免疫共沉淀 | 第37-38页 |
| ·Western Blotting | 第38页 |
| ·BiFC实验载体的构建 | 第38页 |
| ·BiFC实验 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-43页 |
| ·NP真核表达载体的构建 | 第39页 |
| ·BiFC实验载体的构建 | 第39-40页 |
| ·免疫共沉淀确定NP-NP存在相互作用 | 第40-41页 |
| ·BiFC确定NP-NP相互作用 | 第41页 |
| ·NP的C端在NP-NP相互作用中的地位 | 第41-42页 |
| ·BiFC实验目的蛋白表达情况 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 流感病毒的反向遗传系统 | 第45-57页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·细胞株、菌株、鸡胚 | 第45页 |
| ·载体和主要试剂 | 第45-46页 |
| ·引物 | 第46页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-51页 |
| ·扩增目的片段 | 第46-47页 |
| ·polⅠ系统的构建 | 第47-48页 |
| ·polⅠ-polⅡ系统的构建 | 第48-49页 |
| ·报告基因载体的构建 | 第49-50页 |
| ·流感病毒聚合酶活性鉴定 | 第50页 |
| ·拯救病毒 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-55页 |
| ·通过报告基因检测病毒聚合酶的活性 | 第51-54页 |
| ·通过质粒拯救感染性的流感病毒以及病毒的鉴定 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |