摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-20页 |
·苎麻概述 | 第13-14页 |
·苎麻用途 | 第13页 |
·苎麻抗病机制研究 | 第13-14页 |
·根腐线虫 | 第14-15页 |
·根腐线虫概况 | 第14页 |
·根腐线虫的防治 | 第14-15页 |
·抑制消减杂交(SSH) | 第15-17页 |
·抑制消减杂交的原理和方法 | 第15-16页 |
·SSH 在植物抗线虫中的应用 | 第16-17页 |
·表达序列标签(EST)概述 | 第17-19页 |
·EST 的定义 | 第17-18页 |
·EST 的应用 | 第18-19页 |
·本研究的目的意义、主要内容和技术路线 | 第19-20页 |
·目的意义 | 第19页 |
·主要内容 | 第19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
第二章 苎麻抑制消减杂交文库的构建 | 第20-37页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·植物材料 | 第20页 |
·线虫 | 第20页 |
·载体及菌株 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要仪器及耗材 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-29页 |
·嫩梢扦插繁殖苎麻抗性材料 | 第21页 |
·胡萝卜愈伤组织培养法培养纯化线虫 | 第21-22页 |
·线虫接种 | 第22页 |
·总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
·mRNA 的分离和纯化 | 第23页 |
·抑制消减杂交 | 第23-28页 |
·抑制消减杂交文库的构建 | 第28-29页 |
·PCR 扩增检测插入片段 | 第29页 |
·试验结果及分析 | 第29-34页 |
·苎麻抗性材料的验证 | 第29-30页 |
·根腐线虫培养情况 | 第30页 |
·苎麻总 RNA 的提取 | 第30-31页 |
·mRNA 的分离 | 第31页 |
·RsaⅠ酶切效果检测 | 第31-32页 |
·接头连接效率检测 | 第32页 |
·两轮 PCR 扩增检测 | 第32-33页 |
·抑制消减杂交文库的检测 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
·苎麻抗性材料的繁殖及线虫的纯化情况 | 第34页 |
·苎麻 RNA 的提取 | 第34-35页 |
·抑制消减杂交文库的构建 | 第35-36页 |
·本章小结 | 第36-37页 |
第三章 抑制消减杂交文库的筛选及 EST 序列分析 | 第37-50页 |
·试验材料 | 第37页 |
·材料 | 第37页 |
·主要仪器和试剂 | 第37页 |
·试验方法 | 第37-40页 |
·反向 Northern 杂交筛选阳性克隆 | 第37-39页 |
·EST 测序及分析 | 第39-40页 |
·试验结果及分析 | 第40-47页 |
·反向 Northern 斑点杂交筛选结果 | 第40-41页 |
·EST 分析结果 | 第41-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
·本章小结 | 第49-50页 |
第四章 结论与展望 | 第50-51页 |
·结论 | 第50页 |
·展望 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |