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马铃薯液泡酸性转化酶基因的表达调控机制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
縮略词表第10-12页
第一章 前言第12-30页
   ·课题的提出第12-13页
   ·低温糖化第13-22页
     ·马铃薯基因型与低温糖化第14-15页
     ·低温糖化QTL定位和关联分析第15-17页
     ·碳水化合物代谢与低温糖化第17-21页
     ·功能基因组学与低温糖化第21-22页
   ·转化酶第22-27页
     ·液泡转化酶第23-24页
     ·细胞壁转化酶第24-25页
     ·细胞质转化酶第25-27页
   ·基因的表达调控第27-29页
   ·本研究的目的和内容第29-30页
第二章 马铃薯液泡酸性转化酶基因表达模式分析第30-42页
   ·前言第30页
   ·材料与方法第30-34页
     ·实验材料与处理方法第30-31页
     ·油炸薯片的加工及色泽分析第31-32页
     ·还原糖含量和蔗糖含量的测定第32页
     ·可溶性酸性转化酶活性的测定第32-33页
     ·总RNA的提取和RT-qPCR第33-34页
     ·数据分析第34页
   ·结果与分析第34-40页
     ·块茎加工品质评价第34-36页
     ·还原糖、蔗糖含量分析第36-37页
     ·转化酶活性及StvacINV1基因表达模式分析第37-38页
     ·相关性分析第38-40页
   ·讨论第40-42页
第三章 马铃薯液泡酸性转化酶基因启动子的克隆和分析第42-64页
   ·前言第42页
   ·材料与方法第42-49页
     ·实验材料和培养条件第42-43页
     ·基因组DNA的提取和纯化第43页
     ·质粒的提取和纯化第43页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第43-44页
     ·农杆菌感受态细胞的制备及转化第44页
     ·StvacINV1基因启动子的克隆和序列分析第44-45页
     ·启动子::GUS遗传转化载体的构建第45-46页
     ·农杆菌介导的马铃薯试管薯的基因转化第46页
     ·转基因植株的试管苗培养、田间种植及胁迫处理第46-47页
     ·GUS组织化学染色和GUS活性定量测定第47-48页
     ·总RNA的提取和RT-qPCR第48页
     ·数据分析第48-49页
   ·结果与分析第49-62页
     ·StvacINV1基因启动子的克隆和序列分析第49-52页
     ·StvacINV1基因启动子活性分析第52-55页
     ·StvacINV1基因启动子对糖类的应答第55-56页
     ·StvacINV1基因启动子对植物激素的应答第56-57页
     ·StvacINV1基因启动子对低温的应答第57-60页
     ·应答糖类和激素的启动子区域第60-62页
   ·讨论第62-64页
第四章 马铃薯块茎microRNA及其靶基因的分离与分析第64-94页
   ·前言第64-65页
   ·材料与方法第65-68页
     ·植物材料及处理第65页
     ·small RNA文库及降解组文库的构建第65-66页
     ·测序结果的分析第66-67页
     ·miRNA的靶基因鉴定和预测第67-68页
     ·RT-qPCR第68页
     ·数据分析第68页
   ·结果与分析第68-92页
     ·测序结果概况分析第68-71页
     ·miRNA基本信息分析第71-79页
     ·miRNA的靶基因第79-86页
     ·块茎低温贮藏期间差异表达的miRNA第86-87页
     ·差异表达miRNA的RT-qPCR分析第87-88页
     ·靶基因的RT-qPCR分析第88-90页
     ·miRNA及其靶基因比较分析第90-91页
     ·降解组中StvacINV1基因的mRNA分析第91-92页
   ·讨论第92-94页
第五章 讨论第94-100页
   ·StvacINV1基因在转录水平的表达调控机制第94-96页
   ·StvacINV1基因在转录后水平的表达调控机制第96-98页
   ·miRNA与低温糖化第98页
   ·研究展望第98-100页
参考文献第100-122页
附录第122-131页
 附录A StvacINV1基因5’侧翼序列第122-127页
 附录B 用于miRNA RT-qPCR的引物第127-128页
 附录C 用于检测靶基因表达水平的引物第128-130页
 附录D 博士在读期间已发表和正在整理的学术论文第130-131页
致谢第131页

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