玉米胚性愈伤组织形成过程中的miRNA表达分析及遗传转化
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-27页 |
| ·玉米遗传转化的研究现状 | 第13-19页 |
| ·玉米遗传转化的受体 | 第14-16页 |
| ·脱分化的研究现状 | 第16-17页 |
| ·生长素在脱分化中的作用机制 | 第17-18页 |
| ·信号传导的相关基因的表达 | 第18-19页 |
| ·miRNA的研究进展 | 第19-26页 |
| ·植物miRNAs的形成和调节机制 | 第20页 |
| ·miRNA的主要特征 | 第20-21页 |
| ·miRNA作用机制 | 第21页 |
| ·miRNA的检测方法 | 第21-23页 |
| ·miRNA的研究方法 | 第23-25页 |
| ·miRNA调控植物的生长发育 | 第25-26页 |
| ·目的与意义 | 第26-27页 |
| 2. 材料方法 | 第27-43页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-29页 |
| ·主要的仪器设备 | 第29页 |
| ·主要设计软件 | 第29页 |
| ·PCR引物 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-43页 |
| ·玉米材料处理 | 第30-31页 |
| ·提取样品总RNA并检测 | 第31页 |
| ·Solexa深度测序 | 第31-32页 |
| ·差异miRNAs的表达分析 | 第32-34页 |
| ·差异miRNA的靶基因预测及参与的生物学通路 | 第34-35页 |
| ·miRNA表达载体构建 | 第35-40页 |
| ·miRNA表达载体转化农杆菌 | 第40页 |
| ·农杆菌共培养法转化玉米愈伤组织 | 第40-42页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第42-43页 |
| ·T1代转基因植株诱导胚性愈伤组织的诱导率鉴定 | 第43页 |
| 3. 结果与分析 | 第43-72页 |
| ·RNA质量鉴定 | 第43-44页 |
| ·小分子RNA的深度测序 | 第44-51页 |
| ·小分子RNA的长度分布 | 第44页 |
| ·愈伤形成中miRNA的表达量 | 第44-45页 |
| ·愈伤组织中miRNA的表达分析 | 第45-51页 |
| ·差异miRNA的表达验证 | 第51-57页 |
| ·候选miRNA的RT-PCR溶解曲线图 | 第53页 |
| ·候选miRNA的相对表达量 | 第53-57页 |
| ·差异miRNA的靶基因预测 | 第57-58页 |
| ·预测靶基因的生物信息学分析 | 第58-62页 |
| ·GO分析 | 第58-59页 |
| ·pathway分析 | 第59-62页 |
| ·miRNA载体构建及遗传转化 | 第62-66页 |
| ·miRNA表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·miRNA的遗传转化 | 第63-66页 |
| ·T1代部分转基因植株胚性愈伤组织诱导率鉴定 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-72页 |
| ·基因表达量分析方法 | 第67页 |
| ·部分miRNA在愈伤组织形成中的作用机制 | 第67-70页 |
| ·转基因诱导率鉴定 | 第70-71页 |
| ·今后研究方向 | 第71-72页 |
| 4. 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附图1 | 第81-83页 |
| 附表1 | 第83-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
