抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备及其性质的鉴定
| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| ·黄曲霉毒素简介 | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素来源及分布 | 第11页 |
| ·黄曲霉毒素种类及其结构 | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素 B1（AFB1）的危害 | 第12-18页 |
| ·AFB1 对动物的危害 | 第14-15页 |
| ·AFB1 对人类的危害 | 第15-16页 |
| ·AFB1 的致毒机理 | 第16-17页 |
| ·AFB1 的限量标准 | 第17-18页 |
| ·AFB1 的检测方法 | 第18-24页 |
| ·生物检测法 | 第18-19页 |
| ·仪器检测法 | 第19-21页 |
| ·薄层色谱（TLC）法 | 第19页 |
| ·高效液相色谱（HPLC）法 | 第19-20页 |
| ·气质联用（LC-MS）法 | 第20-21页 |
| ·免疫化学检测法 | 第21-24页 |
| ·酶联免疫吸附（ELISA）法 | 第21-22页 |
| ·胶体金（Colloidal Gold）法 | 第22-24页 |
| ·本文主要研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 黄曲霉毒素 B1 完全抗原的制备 | 第25-38页 |
| ·引言 | 第25-28页 |
| ·小分子半抗原和载体蛋白 | 第25页 |
| ·完全抗原的合成原理 | 第25页 |
| ·完全抗原的合成方法 | 第25-27页 |
| ·碳二亚胺法 | 第27页 |
| ·戊二醛法 | 第27页 |
| ·氯甲酸异丁酯法 | 第27页 |
| ·重氮法 | 第27页 |
| ·本章研究的主要目的和主要内容 | 第27-28页 |
| ·材料和方法 | 第28-32页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·AFB1 两种完全抗原的合成 | 第28-30页 |
| ·AFB1 多抗血清的制备 | 第30-32页 |
| ·结果和讨论 | 第32-37页 |
| ·AFB1 肟的制备 | 第32-33页 |
| ·AFB1-BSA 偶联物的鉴定 | 第33-37页 |
| ·紫外扫描鉴定 | 第33-34页 |
| ·红外扫描鉴定 | 第34-35页 |
| ·iELISA 鉴定偶联结果 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 AFB1 单克隆抗体的筛选及鉴定 | 第38-63页 |
| ·引言 | 第38-40页 |
| ·单克隆抗体理论基础 | 第38页 |
| ·分泌特异性抗体的杂交瘤单克隆细胞的流程 | 第38-40页 |
| ·本章研究内容及目的和意义 | 第40页 |
| ·材料和方法 | 第40-61页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-48页 |
| ·实验动物的选择 | 第41页 |
| ·小鼠免疫 | 第41页 |
| ·血清效价的测定 | 第41-42页 |
| ·最佳包被抗原稀释度的测定 | 第42页 |
| ·一抗最佳稀释液的选择 | 第42-43页 |
| ·最佳包被抗原浓度的测定 | 第43页 |
| ·二抗最佳工作浓度的测定 | 第43-44页 |
| ·标准竞争曲线的绘制 | 第44页 |
| ·实际样品前处理 | 第44页 |
| ·加标样品回收率和变异系数的测定 | 第44-45页 |
| ·细胞融合 | 第45页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第45-46页 |
| ·杂交瘤细胞的亚克隆和扩大培养 | 第46页 |
| ·细胞染色体的观察 | 第46页 |
| ·抗 AFB1 单克隆抗体特性鉴定 | 第46-48页 |
| ·实验结果 | 第48-61页 |
| ·血清效价的测定 | 第48页 |
| ·一抗最佳稀释液的选择 | 第48-50页 |
| ·最佳包被抗原稀释度的测定 | 第50-51页 |
| ·最佳包被抗原蛋白浓度的测定 | 第51-52页 |
| ·二抗最佳工作浓度的测定 | 第52-53页 |
| ·标准竞争曲线的绘制 | 第53页 |
| ·加标样品回收率和变异系数的测定 | 第53-54页 |
| ·融合前细胞观察 | 第54页 |
| ·融合后细胞观察 | 第54-55页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第55-57页 |
| ·杂交瘤细胞的亚克隆和扩大培养 | 第57页 |
| ·细胞染色体的观察 | 第57-58页 |
| ·抗体亚型鉴定 | 第58页 |
| ·腹水制备 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第59-60页 |
| ·抗 AFB1 单克隆抗体与其它毒素的交叉反应 | 第60页 |
| ·抗 AFB1 单克隆抗体亲和力的测定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·完全抗原的制备 | 第61页 |
| ·SP2/0 骨髓瘤细胞的复苏和冻存 | 第61页 |
| ·细胞融合 | 第61-62页 |
| ·单克隆筛选 | 第62页 |
| ·免疫方法 | 第62页 |
| ·抗体纯化 | 第62-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-73页 |
