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金黄色葡萄球菌Al-2群体感应以icaR依赖的方式减弱生物膜形成

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
目录第7-10页
第1章 绪论第10-46页
   ·引言第10-11页
   ·金黄色葡萄球菌生理特性及致病机制第11-21页
     ·金黄色葡萄球菌的典型性质第11-13页
     ·金黄色葡萄球菌感染第13-14页
     ·毒力因子第14-15页
     ·小菌落变异体第15-16页
     ·毒力相关的基因调控第16页
     ·金黄色葡萄球菌基因组结构第16-19页
     ·甲氧西林抗性金黄色葡萄球菌株第19-21页
   ·生物膜的本质及特点第21-28页
     ·EPS和生物膜结构第23-25页
     ·生物膜基质主要成分第25-28页
   ·群体感应信号系统调控生物膜形成第28-32页
     ·群体感应信号系统第28-29页
     ·群体感应信号系统对革兰氏阳性细菌生物膜形成的调控第29-32页
   ·金黄色葡萄球菌的生物膜第32-36页
     ·金黄色葡萄球菌生物膜的模式第33-34页
     ·金黄色葡萄球菌生物膜形成的调控机制第34-36页
   ·金黄色葡萄球菌生物膜所致的疾病第36-38页
   ·宿主如何响应金黄色葡萄球菌生物膜感染第38-40页
   ·治疗和预防金黄色葡萄球菌生物膜感染第40-46页
     ·抗生素治疗第41页
     ·抗菌剂直接作用于感染部位治疗第41-42页
     ·疫苗第42-46页
第2章 实验材料和方法第46-56页
   ·菌株与培养条件第46-47页
     ·菌株第46-47页
     ·培养基和染料第47页
   ·分子克隆操作第47-48页
   ·基因突变株构建第48-50页
     ·金葡菌感受态的制备(100ml)第48-49页
     ·luxS基因敲除株的构建第49页
     ·αgr和luxS双基因敲除株的构建第49-50页
   ·回补菌株构建第50页
     ·质粒回补第50页
     ·外源添加化学合成的AI-2回补第50页
   ·荧光菌株的构建第50-51页
   ·厌氧条件下的操作第51页
     ·厌氧培养基的准备第51页
     ·厌氧操作站的使用第51页
   ·生长曲线的测定第51-52页
     ·有氧条件下生长曲线测定第51-52页
     ·厌氧条件下生长曲线测定第52页
   ·生物膜的形成第52-54页
     ·有氧静止条件下成膜第52页
     ·厌氧静止条件下成膜第52页
     ·流动相flow cell成膜第52-53页
     ·体内导管模型中成膜第53-54页
   ·扫描电子显微镜第54页
   ·RNA的分离纯化第54-55页
   ·实时定量反转录PCR第55页
   ·Triton X-100诱导的细胞自溶检测第55页
   ·伦理学声明第55页
   ·统计学分析第55-56页
第3章 实验结果第56-72页
   ·生物信息学分析luxS基因在细菌中的保守性第56-57页
   ·金葡菌RN6390B中的LuxS第57-58页
   ·luxS基因敲除第58-59页
   ·AI-2以浓度依赖的形式抑制静止状态生物膜的形成第59-61页
   ·AI-2抑制flow cell中生物膜的形成第61-62页
   ·突变luxS基因导致体内生物膜形成增强第62-63页
   ·AI-2抑制了icaA的转录水平第63-65页
   ·AI-2激活了icaR的转录水平第65页
   ·AI-2并不影响其他icaA调控子的转录水平第65-66页
   ·AI-2抑制了厌氧条件下生物膜的形成和icaA的转录水平第66-67页
   ·luxS突变株自溶速度减慢第67页
   ·SH1000金葡菌株中luxS突变后不影响生物膜形成第67-68页
   ·luxS缺失对细胞壁相关蛋白的表达没有显著影响第68-69页
   ·LuxS/AI-2 QS系统和agr介导的QS系统在生物膜调控中起到了累加的效应第69-72页
     ·激光共聚显微镜观测flow cell系统中生物膜形成的差异第69页
     ·厌氧条件下静止状态生物膜形成的差异第69-70页
     ·扫描电镜观测flow cell系统中的生物膜形成的差异第70页
     ·厌氧瓶中生物膜形成的差异第70-72页
第4章 讨论第72-76页
   ·关于本文实验结果可参考性的讨论第72页
   ·关于体内AI-2回补的问题的讨论第72页
   ·关于本文实验结果与之前研究结果差别的讨论第72-73页
   ·关于AI-2影响icaR作用机制的讨论第73页
   ·关于AI-2在多种菌群生物膜形成中作用的讨论第73-76页
参考文献第76-86页
致谢第86-88页
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第88页

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