| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-29页 |
| ·立题背景 | 第11-15页 |
| ·文献综述 | 第15-27页 |
| ·乳铁蛋白和乳铁蛋白素研究概况 | 第15-16页 |
| ·牛乳铁蛋白的分子结构 | 第16页 |
| ·牛乳铁蛋白的生物学功能 | 第16-19页 |
| ·牛乳铁蛋白素结构及生物学作用 | 第19-22页 |
| ·细胞增殖、分化和凋亡概述 | 第22-27页 |
| ·乳铁蛋白素抗肿瘤研究进展 | 第27页 |
| ·目的与意义 | 第27-28页 |
| ·本课题的研究内容 | 第28-29页 |
| 2 材料与仪器设备 | 第29-32页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·细胞系 | 第29页 |
| ·人工合成肽 | 第29页 |
| ·试剂与实验耗材 | 第29-30页 |
| ·溶液配制 | 第30页 |
| ·仪器设备 | 第30-32页 |
| 3 方法 | 第32-46页 |
| ·前准备实验 | 第32-33页 |
| ·Jurkat 细胞培养与生长曲线测定 | 第33-34页 |
| ·细胞培养 | 第33-34页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第34页 |
| ·CCK-8 法检测 LfcinB 对 Jurkat 细胞活性的影响 | 第34-35页 |
| ·实验原理 | 第34页 |
| ·CCK-8 法的步骤 | 第34-35页 |
| ·LfcinB 作用 Jurkat 细胞形态学分析 | 第35页 |
| ·实验原理 | 第35页 |
| ·实验前处理 | 第35页 |
| ·Hoechst 33258 染色步骤 | 第35页 |
| ·Annexin-FITC/PI 双标记流式细胞计数检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
| ·实验原理 | 第35-36页 |
| ·实验前处理 | 第36页 |
| ·实验步骤 | 第36页 |
| ·Western Blot 法检测 Jurkat 细胞内 P21waf1、AKT、mTOR 的磷酸化水平和 Notch1、c-MYC、Bcl-2、Bax、CyclinD1 蛋白的表达水平 | 第36-46页 |
| ·实验原理 | 第36-37页 |
| ·实验前处理 | 第37页 |
| ·蛋白提取步骤 | 第37页 |
| ·蛋白定量步骤 | 第37-38页 |
| ·测定 P-P21waf1 蛋白表达水平步骤 | 第38-39页 |
| ·测定 P-AKT 蛋白表达水平步骤 | 第39-40页 |
| ·测定 P-mTOR 蛋白表达水平步骤 | 第40-41页 |
| ·测定 Notch1 蛋白表达水平步骤 | 第41-42页 |
| ·测定 c-MYC 蛋白表达水平步骤 | 第42-43页 |
| ·测定 Bcl-2 和 Bax 蛋白表达水平步骤 | 第43-44页 |
| ·测定 Cyclin D1 蛋白表达水平步骤 | 第44-46页 |
| 4 结果与分析 | 第46-60页 |
| ·细胞培养及生长曲线的测定 | 第46-47页 |
| ·LfcinB 对 Jurkat 细胞增殖的影响 | 第47页 |
| ·LfcinB 诱导 Jurkat 细胞凋亡的形态学分析 | 第47-49页 |
| ·LfcinB 诱导 Jurkat 细胞凋亡的最佳浓度和时间分析 | 第49-54页 |
| ·不同浓度的 LfcinB 作用 Jurkat 细胞不同时间后 P-P21waf1蛋白和 CyclinD1 蛋白表达水平的变化 | 第54-55页 |
| ·不同浓度的 LfcinB 作用 Jurkat 细胞不同时间后 P-AKT 蛋白和 P-mTOR 蛋白表达水平的变化 | 第55-57页 |
| ·不同浓度的 LfcinB 作用 Jurkat 细胞不同时间后 Notch1 蛋白和 c-MYC 蛋白表达水平的变化 | 第57-58页 |
| ·不同浓度的 LfcinB 作用 Jurkat 细胞不同时间后 Bax 蛋白和Bcl-2 蛋白表达水平的变化 | 第58-60页 |
| 5 讨论 | 第60-65页 |
| ·LfcinB 影响 Jurkat 细胞增殖的量效关系 | 第60页 |
| ·LfcinB 诱导 Jurkat 细胞凋亡的形态学分析 | 第60-61页 |
| ·LfcinB 诱导 Jurkat 细胞凋亡的量效分析 | 第61-62页 |
| ·LfcinB 对 Jurkat 细胞增殖、凋亡和分化机制的分析 | 第62-65页 |
| 6 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第74页 |