奶牛源隐孢子虫的鉴定及隐孢子虫囊壁蛋白基因的克隆
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 主要图表 | 第10-11页 |
| 主要英文缩写 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-36页 |
| ·试剂 | 第26-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·病原学方法检测奶牛粪样中隐孢子虫 | 第28-29页 |
| ·粪样的采集 | 第28页 |
| ·虫体的检查 | 第28-29页 |
| ·隐孢子虫的分子鉴定 | 第29-34页 |
| ·隐孢子虫卵囊的分离与纯化 | 第29页 |
| ·隐孢子虫的 DNA 抽提 | 第29页 |
| ·隐孢子虫 18SrRNA 基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·隐孢子虫 HSP70 基因的扩增 | 第30-31页 |
| ·扩增产物检测 | 第31页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第31页 |
| ·胶回收 | 第31页 |
| ·目的基因的连接与重组质粒的转化 | 第31-32页 |
| ·PCR 鉴定重组质粒 | 第32页 |
| ·测序鉴定 | 第32页 |
| ·序列分析和进化树绘制 | 第32-34页 |
| ·隐孢子虫囊壁蛋白基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·隐孢子虫总 RNA 抽提 | 第34页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第34页 |
| ·PCR 反应扩增隐孢子虫囊壁蛋白基因 | 第34页 |
| ·囊壁蛋白基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·囊壁蛋白基因的序列比对 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-45页 |
| ·奶牛源隐孢子虫的分离与鉴定 | 第36-42页 |
| ·隐孢子虫检测结果 | 第36页 |
| ·隐孢子虫卵囊的形态特征 | 第36-37页 |
| ·隐孢子虫的分子鉴定 | 第37-42页 |
| ·隐孢子虫囊壁蛋白基因的克隆 | 第42-45页 |
| ·囊壁蛋白基因的 PCR 扩增结果 | 第42-43页 |
| ·囊壁蛋白基因的测序结果分析 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| ·合肥某奶牛场成年母牛隐孢子虫感染情况 | 第45页 |
| ·奶牛源隐孢子虫的分子鉴定 | 第45-46页 |
| ·隐孢子虫囊壁蛋白的研究 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |