| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| ·生物农药研究进展 | 第12-14页 |
| ·生物农药概述 | 第12页 |
| ·生物农药的潜力和限制 | 第12-13页 |
| ·生防荧光假单胞菌研究概况 | 第13-14页 |
| ·土壤真菌群落多样性的研究现状 | 第14-15页 |
| ·常用的研究土壤微生物多样性的分子生物学方法 | 第15-20页 |
| ·18S RDNA末端标记的限制性片段长度多态性分析(T-RFLP) | 第15-17页 |
| ·变性/温度梯度凝胶电泳(DGGE/TGGE) | 第17-18页 |
| ·焦磷酸测序 | 第18-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-21页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 土壤理化性质的测定及可培养真菌数量的变化 | 第23-29页 |
| ·材料与方法 | 第23-24页 |
| ·培养基配制 | 第23页 |
| ·试验生防菌 | 第23页 |
| ·试验设计 | 第23-24页 |
| ·土壤取样 | 第24页 |
| ·土壤pH的测定 | 第24页 |
| ·测定土壤含水量 | 第24页 |
| ·测定土壤可培养真菌的数量 | 第24页 |
| ·荧光假单胞菌CPF10的根系定殖检测 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·土壤pH和含水量的变化 | 第24-26页 |
| ·生防菌CPF10的回收 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 末端标记限制性片段长度多态性分析方法分析西瓜根围真菌群落的变化 | 第29-42页 |
| ·材料与方法 | 第29-32页 |
| ·试剂与溶液 | 第29-30页 |
| ·仪器与设备 | 第30页 |
| ·土壤真菌DNA提取 | 第30-31页 |
| ·土壤DNA纯度检测 | 第31页 |
| ·土壤DNA的ITS区扩增反应体系及条件 | 第31页 |
| ·PCR产物电泳检测 | 第31页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第31页 |
| ·PCR产物酶切 | 第31-32页 |
| ·消化片段检测 | 第32页 |
| ·数据处理 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-41页 |
| ·土壤真菌DNA提取结果分析 | 第32-33页 |
| ·不同PCR产物纯化方法的T-RFLP数据结果分析 | 第33-36页 |
| ·CPF10处理西瓜生育期内土壤真菌群落多样性 | 第36-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·土壤真菌DNA提取方法对基于分子水平研究群落多样性研究的重要性 | 第41页 |
| ·T-RFLP方法研究土壤微生物动态变化 | 第41-42页 |
| 第四章 PCR-DGGE方法细化生防菌对西瓜根围土壤真菌群落变化的影响 | 第42-51页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·试剂与仪器 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·土壤总DNA的提取 | 第42页 |
| ·真菌18S RDNA V7-V8区的PCR反应体系及条件 | 第42-43页 |
| ·PCR产物电泳检测 | 第43页 |
| ·变性梯度凝胶电泳 | 第43页 |
| ·DGGE条带回收 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·PCR引物的选择 | 第44-45页 |
| ·荧光假单胞菌CPF10对西瓜根围土壤土著真菌的影响 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 巢式PCR-DGGE方法分析生防菌CPF10对西瓜根围丛枝菌根真菌群落变化的影响 | 第51-59页 |
| ·材料与方法 | 第51-52页 |
| ·试剂与仪器 | 第51页 |
| ·菌根真菌(AMF)目的片段PCR反应体系及条件 | 第51-52页 |
| ·PCR产物电泳检测 | 第52页 |
| ·巢式PCR-DGGE变性梯度凝胶电泳 | 第52页 |
| ·DGGE条带回收 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·巢式PCR-DGGE体系优化 | 第52-54页 |
| ·巢式PCR-DGGE方法研究生防菌CPF10对丛枝菌根真菌(AMF)群落变化的影响 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第六章 焦磷酸测序技术研究生防菌处理的西瓜根围真菌群落组成 | 第59-71页 |
| ·材料与方法 | 第60-61页 |
| ·土壤样本 | 第60页 |
| ·ITS1区PCR扩增 | 第60-61页 |
| ·PCR产物纯化和ROCHE 454测序 | 第61页 |
| ·基于操作分类单位(OTU)的序列 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-68页 |
| ·各个样本的稀释曲线 | 第61-62页 |
| ·各样本菌群丰度,多样性及差异性 | 第62-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 第七章 结论与展望 | 第71-73页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| ·展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
