| 中文摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-18页 |
| 符号说明 | 第18-20页 |
| 第一章 前言 | 第20-33页 |
| 1 抗菌肽的来源 | 第20-21页 |
| 2 抗菌肽的结构 | 第21-22页 |
| ·一级结构 | 第21-22页 |
| ·二级结构 | 第22页 |
| 3 抗菌肽的分类 | 第22页 |
| 4 抗菌肽的生物学活性及作用机制 | 第22-26页 |
| ·抗菌作用 | 第22-24页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第24-25页 |
| ·抗真菌作用 | 第25页 |
| ·抗病毒作用 | 第25页 |
| ·抗寄生虫作用 | 第25页 |
| ·抗氧化作用 | 第25-26页 |
| 5 抗菌肽的应用 | 第26-29页 |
| ·在医药行业的应用 | 第26-27页 |
| ·在饲料添加剂行业的应用 | 第27-28页 |
| ·在食品和化妆品行业的应用 | 第28页 |
| ·在转基因领域的研究 | 第28-29页 |
| 6 抗菌肽重组表达系统 | 第29-31页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第30页 |
| ·酵母表达系统 | 第30-31页 |
| 7 本课题拟解决的问题 | 第31-33页 |
| 第二章 抗菌肽OncorhyncinⅡ基因的克隆及毕赤酵母表达载体的构建 | 第33-57页 |
| 1 材料 | 第33-35页 |
| ·菌株及载体 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·分子生物学试剂 | 第34页 |
| ·常用试剂配制方法 | 第34-35页 |
| ·常用的仪器设备 | 第35页 |
| 2 实验步骤与方法 | 第35-47页 |
| ·目的基因的获得 | 第35-37页 |
| ·目的基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·毕赤酵母表达载体pGAOnⅡ的构建 | 第38-43页 |
| ·表达OncorhyncinⅡ毕赤酵母工程菌株的构建 | 第43-47页 |
| 4 实验结果 | 第47-54页 |
| ·目的基因的获得 | 第47-48页 |
| ·毕赤酵母表达载体pGAOnⅡ的构建 | 第48-52页 |
| ·表达OncorhyncinⅡ的毕赤酵母工程菌株的构建 | 第52-54页 |
| 5 讨论 | 第54-57页 |
| 第三章 抗菌肽OncorhyncinⅡ在毕赤酵母中表达生物学活性及发酵液稳定性研究 | 第57-77页 |
| 1 材料 | 第57-58页 |
| ·菌株 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·培养基的配制 | 第57-58页 |
| ·常用试剂配制方法 | 第58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| 2 实验步骤与方法 | 第58-64页 |
| ·重组抗菌肽的表达及鉴定 | 第58-60页 |
| ·重组抗菌肽抗菌活性的初步研究 | 第60-62页 |
| ·抗菌肽稳定性研究 | 第62-63页 |
| ·重组毕赤酵母摇瓶发酵条件优化 | 第63-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-75页 |
| ·重组抗菌肽OncorhyncinⅡ在酿酒酵母工程菌中的表达 | 第64页 |
| ·重组抗菌肽抗菌活性研究 | 第64-69页 |
| ·对发酵液中抗菌肽的稳定性研究 | 第69-75页 |
| 4. 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 抗菌肽OncorhyncinⅡ的分离纯化及性质研究 | 第77-87页 |
| 1 实验材料 | 第77页 |
| ·试剂材料 | 第77页 |
| ·仪器设备 | 第77页 |
| 2 实验方法 | 第77-79页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ的纯化 | 第77-78页 |
| ·Bradford法测定纯化后目的多肽OncorhyncinⅡ含量 | 第78-79页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ的稳定性试验 | 第79页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第79页 |
| 3 实验结果 | 第79-85页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ的纯化 | 第79-81页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ的活性 | 第81-83页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ的浓度测定 | 第83页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ的稳定性试验 | 第83-84页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第84-85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 第五章 抗菌肽OncorhyncinⅡ的抗菌机制研究 | 第87-97页 |
| 1 实验材料 | 第87页 |
| ·试剂材料 | 第87页 |
| ·常用试剂配制 | 第87页 |
| ·仪器与设备 | 第87页 |
| 2 实验步骤与方法 | 第87-90页 |
| ·抗菌肽的抑菌动力学研究 | 第87-89页 |
| ·观察抗菌肽OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌细胞形态的影响 | 第89-90页 |
| 3 实验结果 | 第90-95页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响 | 第90-91页 |
| ·抗菌肽OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌细胞通透性的影响 | 第91-92页 |
| ·活细胞成像系统观察OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌细胞形态的影响 | 第92-94页 |
| ·透射显微镜观察OncorhyncinⅡ对金黄色葡萄球菌细胞形态的影响 | 第94-95页 |
| 4 讨论 | 第95-97页 |
| 总结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第104-105页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第105页 |
