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诸葛菜遗传转化体系的建立与优化

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-11页
缩写第11-12页
1 文献综述第12-30页
   ·诸葛菜简介第12页
     ·科属归类第12页
     ·名字由来第12页
     ·生长特性第12页
     ·分布区域第12页
   ·诸葛菜用途及其评价第12-14页
     ·油料作物第12页
     ·食用价值第12页
     ·饲料植物第12-13页
     ·观赏价值第13页
     ·营养成分分析第13页
     ·药用及保健研究第13-14页
   ·诸葛菜主要脂肪酸为亚油酸第14-15页
     ·诸葛菜种子油亚油酸含量高第14页
     ·亚油酸的应用第14-15页
   ·多不饱和脂肪酸研究第15-20页
     ·多不饱和脂肪酸的结构和分类第15-16页
       ·多不饱和脂肪酸的分类第15页
       ·多不饱和脂肪酸的结构第15-16页
     ·多不饱和脂肪酸的来源第16-17页
       ·ω-3系列脂肪酸主要来源第16页
       ·ω-6系列脂肪酸主要来源第16-17页
     ·多不饱和脂肪酸的生理功能及其应用第17-18页
       ·在食品方面的应用第17页
       ·在医药方面的应用第17-18页
       ·在日用品方面的应用第18页
       ·在工业方面的应用第18页
     ·多不饱和脂肪酸生物合成的一般途径第18-19页
     ·多不饱和脂肪酸的植物育种策略第19页
     ·多不饱和脂肪酸的基因工程研究进展第19-20页
   ·Epoxygenase(环氧化酶)和Acetylase(炔基还原酶)第20-22页
     ·epoxy fatty acid(环氧脂肪酸)和acetylenic fatty acid(炔基脂肪酸)的发现第20-21页
     ·Epoxygenase和Acetylase的克隆第21页
     ·epoxy fatty acid和acetylenic fatty acid的机制第21-22页
   ·诸葛菜的研究现状第22页
   ·常用的植物遗传转化方法第22-26页
     ·以外植体为受体的基因转化方法第23-25页
       ·农杆菌介导法第23-25页
       ·基因枪法第25页
       ·超声波介导法第25页
     ·以种质系统为受体的基因转化方法第25-26页
       ·花粉管通道法第25页
       ·子房注射法第25-26页
   ·诸葛菜遗传转化体系第26-27页
     ·诸葛菜转基因的受体系统、筛选标记和报告基因第26-27页
       ·诸葛菜转基因的受体系统第26-27页
       ·诸葛菜转基因的筛选标记第27页
       ·诸葛菜转基因的报告基因第27页
   ·影响诸葛菜遗传转化体系的因素第27-28页
     ·外植体对诸葛菜转化的影响第27页
     ·外植体的处理对诸葛菜转化的影响第27-28页
     ·培养基成分和外植体培养条件对诸葛菜转化的影响第28页
     ·基因型对诸葛菜转化的影响第28页
   ·转基因诸葛菜的分子鉴定第28-29页
     ·PCR检测第28页
     ·Southern杂交第28-29页
   ·本课题研究的目的和意义第29-30页
2 材料与方法第30-41页
   ·试验材料第30-35页
     ·植物材料第30页
     ·质粒第30-32页
     ·农杆菌和大肠杆菌菌种第32页
     ·培养基第32页
     ·仪器和设备、酶与试剂第32-33页
     ·主要溶液第33-35页
   ·实验方法第35-41页
     ·大肠杆菌感受态的制备第35页
     ·大肠杆菌的常规转化第35页
     ·大肠杆菌的快速转化第35-36页
     ·质粒DNA的抽提第36页
     ·质粒DNA的纯化第36页
     ·TAKARA胶回收试剂盒回收DNA第36-37页
     ·农杆菌感受态的制备第37页
     ·农杆菌的转化(冻融法)第37页
     ·农杆菌菌种的保存第37-38页
     ·诸葛菜种子的无菌萌发第38页
     ·工程感染菌株的准备第38页
     ·诸葛菜未转化苗的卡那霉素梯度试验第38页
     ·菌液浓度和感染时间对诸葛菜转化再生的影响第38页
     ·诸葛菜下胚轴的遗传转化第38-39页
       ·预培养第38页
       ·共培养第38-39页
       ·分化培养第39页
       ·扩繁筛选、生根培养第39页
       ·室内炼苗、移栽第39页
     ·诸葛菜基因组总DNA的提取第39页
     ·PCR检测第39-41页
3 结果与分析第41-46页
   ·诸葛菜未转化苗的卡那霉素梯度试验第41页
   ·菌液浓度以及感染时间对诸葛菜转化苗的影响第41-43页
   ·农杆菌介导的诸葛菜转化程序第43-44页
   ·转基因诸葛菜的PCR鉴定第44-46页
4 讨论与展望第46-50页
   ·诸葛菜遗传转化再生体系第46-48页
     ·外植体的选择第46页
     ·卡那霉素筛选浓度的确定第46-47页
     ·菌液感染时间和菌液浓度的选择第47页
     ·预培养时间第47页
     ·共培养时间第47-48页
     ·抗生素的选择第48页
   ·本实验的后续工作第48页
   ·前景和展望第48-50页
参考文献第50-57页
致谢第57页

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