变形杆菌脂肪酶基因合成和毕赤酵母表达
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| ·脂肪酶研究概述 | 第10-11页 |
| ·非水相脂肪酶催化概述 | 第11-17页 |
| ·脂肪酶在非水相中的催化机制 | 第12页 |
| ·有机溶剂对脂肪酶非水相催化的影响 | 第12-13页 |
| ·耐有机溶剂脂肪酶 | 第13-15页 |
| ·在非水相催化中的脂肪酶应用 | 第15-16页 |
| ·本实验所选脂肪酶基因 | 第16-17页 |
| ·脂肪酶的毕赤酵母表达系统 | 第17-20页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优点 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母表达载体及其元件 | 第18-19页 |
| ·宿主菌 | 第19页 |
| ·重组蛋白翻译后修饰 | 第19-20页 |
| ·影响毕赤酵母外源蛋白表达的因素 | 第20页 |
| ·本试验的研究意义和内容 | 第20-21页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·脂肪酶基因密码子的优化、引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·全基因序列的人工合成及校正 | 第22页 |
| ·重组酵母表达质粒 | 第22页 |
| ·重组表达质粒的双酶切验证 | 第22-23页 |
| ·感受态毕赤酵母的制备 | 第23页 |
| ·重组毕赤酵母工程菌的构建及转化子的筛选 | 第23-25页 |
| ·功能平板检测验证转化子 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE电泳验证 | 第26页 |
| ·在毕赤酵母中诱导表达脂肪酶基因 | 第26-28页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第28-36页 |
| · | 第28-36页 |
| ·变形杆菌脂肪酶成熟肽基因的获得 | 第28-32页 |
| ·重组酵母表达质粒 | 第32-33页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组菌株在诱导培养基上的形态特点 | 第34-35页 |
| ·变形杆菌属脂肪酶基因SW1重组表达 | 第35-36页 |
| 第四部分 讨论与展望 | 第36-37页 |
| ·本研究主要所做工作 | 第36页 |
| ·结果 | 第36页 |
| ·展望 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
