| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 文献综述 | 第8-21页 |
| 1 玉米矮花叶病的基本概况 | 第8-11页 |
| ·玉米矮花叶病的特性 | 第8-11页 |
| ·分布及危害 | 第8页 |
| ·病毒形态及株系划分 | 第8-10页 |
| ·发病症状及寄主范围 | 第10页 |
| ·玉米矮花叶病的传播 | 第10-11页 |
| 2 玉米矮花叶病防治方法 | 第11-12页 |
| ·物理方法 | 第11页 |
| ·化学方法 | 第11页 |
| ·生物方法 | 第11-12页 |
| 3 RNAi技术及其在植物中应用 | 第12-21页 |
| ·RNA干扰机理及应用 | 第12-13页 |
| ·RNAi的特点外源 | 第13页 |
| ·RNA沉默的机理 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰在植物抗病毒基因工程中的应用 | 第14-17页 |
| ·RNA沉默与植物病毒 | 第14-15页 |
| ·RNA干扰在植物抗病毒基因工程中的应用 | 第15-16页 |
| ·外源dsRNA的抗病性研究 | 第16-17页 |
| ·RNA干扰技术的相关问题 | 第17-19页 |
| ·dsRNA的产生 | 第17-18页 |
| ·dsRNA序列的选择 | 第18页 |
| ·dsRNA的长度选择 | 第18页 |
| ·dsRNA表达载体的构建 | 第18-19页 |
| ·玉米抗病毒基因工程研究现状 | 第19-21页 |
| 引言 | 第21-24页 |
| 1 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株质粒及主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-37页 |
| ·玉米叶片总RNA的提取、检测和反转录反应 | 第24-26页 |
| ·甘蔗花叶病毒CP基因特异片段的RT-PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第27-28页 |
| ·RNA干涉原核表达载体LMCP的构建 | 第28-32页 |
| ·dsRNA的体外诱导表达 | 第32页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第32-33页 |
| ·dsRNA的稳定性 | 第33页 |
| ·外源dsRNA对玉米矮花叶病毒病的干扰效果 | 第33-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-46页 |
| ·玉米叶片总RNA的提取 | 第37页 |
| ·RNA干涉片段的制备 | 第37页 |
| ·pUCCRNAi+F及pUCCRNAi+2F的构建 | 第37-38页 |
| ·原核表达载体构建LMCP的建立 | 第38-39页 |
| ·原核表达载体LMCPdsRNA的诱导表达 | 第39页 |
| ·dsRNA诱导表达条件的优化 | 第39-40页 |
| ·IPTG的浓度对诱导表达产物的影响 | 第39-40页 |
| ·诱导时间对dsRNA表达量的影响 | 第40页 |
| ·dsRNA的稳定性 | 第40-41页 |
| ·不同缓冲液对dsRNA稳定性的影响 | 第40-41页 |
| ·放置时间对dsRNA稳定性的影响 | 第41页 |
| ·外源dsRNA抗甘蔗花叶病毒的干扰调控效果 | 第41-46页 |
| ·不同细菌表达提取液对SCMV侵染的抑制效果 | 第41-43页 |
| ·体外表达的dsRNA粗提液浓度对SCMV的干涉效果 | 第43页 |
| ·不同接毒时间对SCMV的干扰效果 | 第43-44页 |
| ·渗透剂处理对SCMV侵染的影响 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |