| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-19页 |
| ·肝纤维化概述 | 第9-17页 |
| ·肝纤维化发病机制 | 第9-10页 |
| ·肝纤维化重要的病理改变过程 | 第10-13页 |
| ·抗肝纤维化药物作用靶点 | 第13-14页 |
| ·抗肝纤维化药物研究 | 第14-17页 |
| ·Kallistatin概述 | 第17-18页 |
| ·本课题的来源、研究思路与主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·本课题的来源与研究意义 | 第18页 |
| ·本课题的研究思路与主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第2章 重组人Kallistatin蛋白的制备 | 第19-32页 |
| ·材料与溶液配制 | 第19-23页 |
| ·试剂与菌株 | 第19-20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·溶液配制 | 第20-23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·重组人Kallistatin蛋白的摇瓶发酵表达 | 第23-24页 |
| ·苯基-琼脂糖凝胶柱层析 | 第24页 |
| ·葡聚糖凝胶柱层析 | 第24页 |
| ·肝素亲和柱层析 | 第24-25页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·蛋白质印迹法 | 第26-27页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第27-28页 |
| ·实验结果 | 第28-31页 |
| ·苯基琼脂糖凝胶柱层析 | 第28页 |
| ·葡聚糖凝胶G-25柱层析 | 第28-29页 |
| ·肝素亲和柱层析 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE鉴定 | 第30页 |
| ·Western-blot鉴定 | 第30-31页 |
| ·ELISA测定Kallistatin含量 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第3章 重组人Kallistatin蛋白治疗小鼠肝纤维化的实验研究 | 第32-57页 |
| ·材料与溶液配制 | 第32-34页 |
| ·实验动物与药品耗材 | 第32-33页 |
| ·仪器 | 第33-34页 |
| ·溶液配制 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-41页 |
| ·肝纤维化小鼠模型的构建及给药 | 第34-35页 |
| ·血清及肝组织样品的制备保存 | 第35页 |
| ·组织匀浆的制备 | 第35页 |
| ·石蜡标本的制备 | 第35页 |
| ·石蜡标本的切片 | 第35页 |
| ·HE染色 | 第35-36页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第36页 |
| ·ALT检测方法 | 第36-37页 |
| ·AST检测方法 | 第37-38页 |
| ·ALB检测方法 | 第38页 |
| ·总SOD活性检测方法 | 第38-39页 |
| ·MDA检测方法 | 第39页 |
| ·BCA蛋白浓度测定 | 第39页 |
| ·Hyp检测方法 | 第39-40页 |
| ·HA检测方法 | 第40页 |
| ·C-Ⅲ检测方法 | 第40页 |
| ·LN检测方法 | 第40-41页 |
| ·数据统计 | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-56页 |
| ·肝纤维化小鼠模型的构建及给药 | 第41-43页 |
| ·HE染色 | 第43-44页 |
| ·免疫组化染色 | 第44-46页 |
| ·肝功能（ALT、AST、ALB）检测 | 第46-47页 |
| ·纤维化血清标志物（HA、LN、C-Ⅲ）检测 | 第47-49页 |
| ·肝组织指标（SOD、MDA、Hyp）检测 | 第49-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第4章 结论 | 第57-59页 |
| ·研究总结及创新点 | 第57-58页 |
| ·研究总结 | 第57页 |
| ·创新点 | 第57-58页 |
| ·需进一步开展的工作 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文 | 第69页 |