摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-22页 |
1 前言 | 第12-13页 |
2 动物物种鉴定方法概述 | 第13-18页 |
·传统的鉴定方法 | 第13-15页 |
·形态标记 | 第13-14页 |
·细胞学标记 | 第14页 |
·生化标记 | 第14-15页 |
·DNA分子标记用于物种鉴定 | 第15-18页 |
·RFLP应用于物种鉴定 | 第15-16页 |
·RAPD应用于物种鉴定 | 第16页 |
·AFLP应用于物种鉴定 | 第16页 |
·种属特异性基因座PCR法用于物种鉴定 | 第16-17页 |
·微卫星DNA用于物种鉴定 | 第17-18页 |
3 鳕鱼物种的鉴定 | 第18页 |
4 扇贝物种的鉴定 | 第18-19页 |
5 中国鲎的分子保护 | 第19-22页 |
第二部分 研究试验 | 第22-74页 |
第一章 鳕鱼物种PCR鉴定方法的建立及应用 | 第22-34页 |
摘要 | 第22-23页 |
1 材料与方法 | 第23-25页 |
·材料 | 第23-24页 |
·供试材料 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·方法 | 第24-25页 |
·DNA提取方法 | 第24页 |
·灵敏性实验 | 第24-25页 |
·引物的设计 | 第25页 |
·PCR扩增条件 | 第25页 |
·电泳 | 第25页 |
2 实验结果 | 第25-31页 |
·引物的设计与合成 | 第25-26页 |
·引物扩增结果 | 第26-29页 |
·盲测试验结果 | 第29-30页 |
·灵敏性分析 | 第30页 |
·PCR产物碱基序列比较分析结果 | 第30页 |
·实际应用情况 | 第30-31页 |
3 讨论与结论 | 第31-32页 |
·引物的设计与合成 | 第31-32页 |
·鱼内脏DNA的提取 | 第32页 |
参考文献 | 第32-34页 |
第二章 扇贝的微卫星鉴定方法的研究 | 第34-62页 |
摘要 | 第34-35页 |
1 实验材料 | 第35-37页 |
·实验样品 | 第35-36页 |
·质粒和菌株 | 第36页 |
·文库筛选所采用的引物 | 第36页 |
·主要药品 | 第36-37页 |
2 实验方法 | 第37-46页 |
·DNA样品的制备 | 第37页 |
·扇贝DNA样品的制备 | 第37页 |
·利用小插入片段基因组文库和富集文库筛选微卫星标记 | 第37-44页 |
·利用小插入片段文库筛选微卫星标记 | 第37-40页 |
·利用微卫星富集文库筛选微卫星标记 | 第40-43页 |
·DNA序列的测定和分析 | 第43-44页 |
·引物设计 | 第44页 |
·引物的优化 | 第44页 |
·电泳检测 | 第44页 |
·从EST数据库中筛选微卫星标记 | 第44-45页 |
·DHPLC分析 | 第45页 |
·四种扇贝特异性微卫星标记的确认及应用 | 第45-46页 |
·四种扇贝特异性微卫星标记的确认 | 第45-46页 |
·扇贝闭壳肌样品的鉴定 | 第46页 |
3 实验结果与数据分析 | 第46-59页 |
·利用小插入片段基因组文库和富集文库筛选SSR标记 | 第46-49页 |
·ESTs数据库筛选SSR标记 | 第49-51页 |
·WAVE系统检测微卫星位点技术体系的建立 | 第51页 |
·扇贝标准SSR标记位点筛选 | 第51-53页 |
·SSR标记在扇贝物种鉴定中的应用 | 第53-57页 |
·四种扇贝特异性SSR标记的确定 | 第53-55页 |
·扇贝闭壳肌鉴定结果 | 第55-57页 |
·扇贝种类鉴定方法的应用 | 第57-59页 |
4 结论 | 第59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
第三章 中国鲎物种鉴定荧光PCR方法研究 | 第62-74页 |
摘要 | 第62-63页 |
1 材料和方法 | 第63-66页 |
·材料 | 第63-64页 |
·供试材料 | 第63-64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
·主要仪器 | 第64页 |
·方法 | 第64-66页 |
·DNA提取 | 第64-65页 |
·灵敏性实验 | 第65页 |
·引物设计 | 第65页 |
·基于SYBR Green Ⅰ染料技术的实时荧光PCR反应 | 第65-66页 |
2 结果 | 第66-68页 |
·引物特异性 | 第66-67页 |
·盲测试验结果 | 第67页 |
·灵敏性分析 | 第67-68页 |
·荧光PCR产物碱基序列比较分析结果 | 第68页 |
·方法应用 | 第68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
·引物的设计与合成 | 第68-69页 |
·SYBR GreenⅠ荧光PCR的设计 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-74页 |
第三部分 成果转化及发表论文情况 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |