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转基因pemG1及HaHR3作物的获得及功能分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 文献综述第11-21页
   ·激发子概述第11-12页
     ·蛋白激发子第11页
     ·激发子应用前景第11-12页
   ·RNA 干涉综述第12-13页
     ·RNA 干涉的发现第12页
     ·RNA 干涉机制第12页
     ·RNA 干涉的应用第12-13页
   ·转基因棉花第13-14页
     ·植物转基因技术的发展第13页
     ·转基因棉花的方法第13-14页
     ·棉花遗传转化中所用的外植体第14页
     ·棉花遗传转化中所用的培养基第14页
     ·棉花遗传转化中存在的问题和对策第14页
   ·转基因烟草第14-15页
     ·转基因烟草研究的意义第14-15页
     ·转基因烟草研究方法第15页
   ·转基因植物的筛选第15-18页
     ·基因转化的选择标记第15-17页
     ·报告基因第17-18页
   ·转基因植物的分子鉴定第18-19页
   ·研究背景和意义第19-21页
2 引言第21-22页
3 材料与方法第22-38页
   ·实验材料第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·目的基因第22页
     ·菌种和载体第22页
     ·常用酶和试剂盒第22页
     ·主要试剂和药品第22页
     ·主要溶液的配置第22-23页
     ·常用缓冲溶液和培养基第23页
   ·仪器设备第23-24页
   ·实验方法第24-38页
     ·植物表达载体的构建第26页
     ·植物表达载体转化农杆菌 LBA4404第26页
     ·根癌农杆菌中植物表达载体的检测第26-27页
     ·棉花无菌苗的培养第27页
     ·以下胚轴为受体棉花植株的获得第27-28页
     ·棉花组培过程中的继代培养基第28-29页
     ·以茎尖分生组织为受体棉花植株的获得第29-30页
     ·转基因烟草所用培养基第30-31页
     ·农杆菌介导法转基因烟草的获得第31页
     ·棉花基因组的提取第31-32页
     ·烟草 DNA 的提取第32页
     ·棉花抗性愈伤组织的 PCR 检测第32页
     ·棉花茎尖幼芽的 PCR 检测第32页
     ·再生棉苗的 PCR 检测第32页
     ·三生烟再生植株的 PCR 检测第32页
     ·转基因植株的 PCR 产物测序第32页
     ·转基因棉花植株的 RT-PCR 检测第32-33页
     ·转基因烟草的反转录 PCR 检测第33-34页
     ·转基因棉花植株的 Southern blot 分析第34-36页
     ·转基因烟草的 Southern blot 分析第36页
     ·转基因棉花植株抗病性测定第36页
     ·转基因烟草植株对棉铃虫的抑制效果测定第36-38页
4 结果与分析第38-55页
   ·植物表达载体的酶切和测序鉴定第38-39页
   ·农杆菌中植物表达载体的菌液 PCR 检测第39-40页
   ·农杆菌介导法转化棉花的结果与分析第40-45页
     ·无菌苗培养方案的确定第40页
     ·以下胚轴为受体棉花植株得到的结果第40-42页
     ·以茎尖为受体棉花植株得到的结果第42-45页
   ·转基因三生烟植株的获得第45-46页
   ·转基因棉花的分子检测结果第46-50页
     ·棉花试剂盒提取基因组 DNA 分析第46-47页
     ·棉花抗性愈伤组织的 PCR 分析第47页
     ·棉花茎尖幼芽的 PCR 分析第47页
     ·再生棉苗的 PCR 分析第47-48页
     ·再生棉苗的 PCR 产物测序结果第48页
     ·棉花 RNA 提取分析第48-49页
     ·转基因棉花再生苗的 RT-PCR 分析第49页
     ·转基因棉花的 Southern blot 分析第49-50页
   ·转基因烟草再生植株的分子检测结果第50-52页
     ·三生烟再生植株的 DNA 提取分析第50页
     ·三生烟再生植株的 PCR 分析第50-51页
     ·三生烟再生植株的 PCR 产物测序结果第51页
     ·三生烟再生植株 RNA 提取分析第51页
     ·转基因烟草 RT-PCR 分析第51-52页
     ·三生烟再生植株的 southern blot 分析第52页
   ·转基因棉花植株抗病性结果分析第52页
   ·转基因烟草植株对棉铃虫抑制效果分析第52-55页
5 讨论第55-58页
   ·无菌苗培养要点第55页
   ·影响以下胚轴为受体转化棉花的因素第55页
   ·影响以茎尖为受体转化棉花的因素第55-56页
   ·真菌激发子基因表达对棉花的影响第56页
   ·植物介导的 RNA 干扰作用原理第56-57页
   ·三生烟介导的 RNAi 对棉铃虫的抑制第57-58页
6 结论第58-59页
7 参考文献第59-63页
附录 A第63-65页
附录 B第65-66页
附录 C第66-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页
[附]在读期间发表论文第68页

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