海南福山香蕉地土壤细菌和真菌多样性分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1 土壤微生物多样性的概念 | 第10-12页 |
| ·土壤微生物物种多样性 | 第10-11页 |
| ·土壤微生物遗传多样性 | 第11页 |
| ·土壤微生物生态系统多样性 | 第11页 |
| ·土壤微生物功能多样性 | 第11-12页 |
| 2 土壤微生物多样性的研究方法 | 第12-19页 |
| ·传统平板培养法 | 第12-13页 |
| ·BIOLOG微平板分析法 | 第13-14页 |
| ·磷脂脂肪酸分析法 | 第14-15页 |
| ·分子生物学方法 | 第15-19页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 香蕉地土壤微生物数量多样性分析 | 第20-27页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| ·样品采集地描述 | 第20页 |
| ·药品及仪器 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·分析软件 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-22页 |
| ·样品采集和保存 | 第21页 |
| ·土壤含水量及pH值测定 | 第21页 |
| ·土壤微生物菌落计数 | 第21-22页 |
| ·数据分析 | 第22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-25页 |
| ·土壤含水量及pH值 | 第22页 |
| ·土壤中真菌、细菌计数 | 第22-25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 香蕉地土壤DNA提取 | 第27-34页 |
| 1 实验材料 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·主要药品及试剂盒 | 第27-28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| 2 土壤微生物总DNA提取 | 第29-31页 |
| ·土壤微生物总DNA直接提取法 | 第29-30页 |
| ·土壤微生物总DNA间接提取法 | 第30页 |
| ·提取DNA的纯度检测和定量 | 第30-31页 |
| 3 结果分析 | 第31-33页 |
| ·土壤总DNA提取电泳检测 | 第31-32页 |
| ·土壤总DNA的提取量和纯度 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 香蕉地土壤细菌多样性分析 | 第34-51页 |
| 1 实验材料 | 第34-35页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·药品和仪器 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-41页 |
| ·土壤总DNA的16SrDNA片段的扩增 | 第35-36页 |
| ·PCR产物的检测及回收 | 第36页 |
| ·感受态细胞(E.coli DH5 α)的制备 | 第36页 |
| ·PCR回收产物与载体的连接 | 第36页 |
| ·连接产物转化DH5 α感受态细胞 | 第36-37页 |
| ·质粒双酶切电泳检测筛选阳性克隆 | 第37-39页 |
| ·文库的保存 | 第39页 |
| ·RFLP分析 | 第39-41页 |
| ·DNA序列测定和16SrDNA系统发育分析 | 第41页 |
| 3 结果分析 | 第41-50页 |
| ·土壤总DNA的16SrDNA扩增 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆子检测 | 第42-43页 |
| ·菌落PCR | 第43-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 ITS文库构建 | 第51-58页 |
| 1 实验材料 | 第51页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·药品和仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·引物 | 第51页 |
| 2 试验方法 | 第51-53页 |
| ·土壤总DNA的ITS片段的扩增 | 第51-52页 |
| ·PCR产物的检测及回收 | 第52页 |
| ·连接转化 | 第52-53页 |
| ·筛选阳性克隆子 | 第53页 |
| ·文库的保存 | 第53页 |
| 3 结果分析 | 第53-57页 |
| ·土壤总DNA的ITS扩增 | 第53-54页 |
| ·ITS文库 | 第54-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 第六章 主要结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
