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p53在凝血酶影响肺癌细胞功能中的作用及其机制

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-8页
第1章 绪论第8-12页
   ·研究背景第8-10页
     ·凝血酶和 PAR1 在肺癌上的研究概况第8-9页
     ·p53 在肿瘤上的研究概况第9-10页
   ·研究目的和意义第10-11页
   ·目前存在的问题及研究内容第11-12页
第2章 凝血酶及其受体 PAR1 在肺癌细胞中的功能和机制第12-32页
   ·实验材料第12-16页
     ·细胞、载体、菌和 qPCR 引物第12页
     ·实验主要试剂第12-13页
     ·实验溶液配制第13-15页
     ·实验仪器第15-16页
   ·实验方法第16-22页
     ·质粒提取第16-17页
     ·细胞培养第17页
     ·细胞转染第17-18页
     ·PCR 检测 PAR1 mRNA 水平第18-20页
     ·细胞粘附实验第20页
     ·细胞迁移实验第20-21页
     ·细胞克隆形成实验第21页
     ·细胞胶原收缩实验第21页
     ·蛋白免疫印迹(Western blot)第21-22页
   ·实验结果第22-30页
     ·构建重组 PAR1 的 PLA-801C 和 PLA-801D 肺癌细胞第22-23页
     ·PCR 鉴定重组 PAR1 质粒的干涉和过表达效果第23-24页
     ·qPCR 鉴定重组 PAR1 的干涉和过表达效率第24-25页
     ·凝血酶通过 PAR1 促肺癌细胞粘附第25-26页
     ·凝血酶通过 PAR1 促肺癌细胞迁移第26-27页
     ·PAR1 对肺癌细胞克隆形成能力的影响第27-28页
     ·凝血酶通过 PAR1 促进 PLA-801D 肺癌细胞胶原收缩能力第28-29页
     ·凝血酶对 PAR1 过表达和干涉的肿瘤细胞中 p53 表达的影响第29-30页
   ·讨论第30-31页
   ·本章小结第31-32页
第3章 p53 在凝血酶影响肺癌细胞功能中的作用及其机制第32-50页
   ·实验材料第32-33页
     ·细胞、载体、菌和 qPCR 引物第32页
     ·实验主要试剂第32-33页
     ·实验溶液配制第33页
     ·实验仪器第33页
   ·实验方法第33-39页
     ·质粒提取第33-34页
     ·细胞培养第34页
     ·细胞转染第34页
     ·PCR 检测 p53 mRNA 水平第34-35页
     ·全长目的基因片段 p53 与 T 克隆载体连接、鉴定、测序第35-38页
     ·细胞凋亡试验第38页
     ·细胞周期实验第38页
     ·蛋白免疫印迹(Western blot)第38-39页
   ·实验结果第39-47页
     ·肺癌细胞中 p53 的表达第39-40页
     ·全长目的基因片段 p53 的测序第40-41页
     ·重组 p53 过表达载体转染 A549 肺癌细胞第41-42页
     ·qPCR 鉴定重组 p53 的过表达效率第42页
     ·Western Blot 检测重组 p53 的过表达效果第42-43页
     ·PAR1 参与凝血酶对 p53 的下调第43页
     ·凝血酶对过表达 p53 肺癌细胞凋亡的影响第43-45页
     ·凝血酶对过表达 p53 肺癌细胞周期的影响第45-46页
     ·凝血酶对过表达 p53 肺癌细胞中 caspase-3、p21、p-Erk 的影响第46-47页
   ·讨论第47-49页
   ·本章小结第49-50页
结论第50-52页
参考文献第52-56页
附录第56-62页
硕士研究生期间发表的学术论文第62-64页
致谢第64页

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