| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-12页 |
| ·研究背景 | 第8-10页 |
| ·凝血酶和 PAR1 在肺癌上的研究概况 | 第8-9页 |
| ·p53 在肿瘤上的研究概况 | 第9-10页 |
| ·研究目的和意义 | 第10-11页 |
| ·目前存在的问题及研究内容 | 第11-12页 |
| 第2章 凝血酶及其受体 PAR1 在肺癌细胞中的功能和机制 | 第12-32页 |
| ·实验材料 | 第12-16页 |
| ·细胞、载体、菌和 qPCR 引物 | 第12页 |
| ·实验主要试剂 | 第12-13页 |
| ·实验溶液配制 | 第13-15页 |
| ·实验仪器 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-22页 |
| ·质粒提取 | 第16-17页 |
| ·细胞培养 | 第17页 |
| ·细胞转染 | 第17-18页 |
| ·PCR 检测 PAR1 mRNA 水平 | 第18-20页 |
| ·细胞粘附实验 | 第20页 |
| ·细胞迁移实验 | 第20-21页 |
| ·细胞克隆形成实验 | 第21页 |
| ·细胞胶原收缩实验 | 第21页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot) | 第21-22页 |
| ·实验结果 | 第22-30页 |
| ·构建重组 PAR1 的 PLA-801C 和 PLA-801D 肺癌细胞 | 第22-23页 |
| ·PCR 鉴定重组 PAR1 质粒的干涉和过表达效果 | 第23-24页 |
| ·qPCR 鉴定重组 PAR1 的干涉和过表达效率 | 第24-25页 |
| ·凝血酶通过 PAR1 促肺癌细胞粘附 | 第25-26页 |
| ·凝血酶通过 PAR1 促肺癌细胞迁移 | 第26-27页 |
| ·PAR1 对肺癌细胞克隆形成能力的影响 | 第27-28页 |
| ·凝血酶通过 PAR1 促进 PLA-801D 肺癌细胞胶原收缩能力 | 第28-29页 |
| ·凝血酶对 PAR1 过表达和干涉的肿瘤细胞中 p53 表达的影响 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第3章 p53 在凝血酶影响肺癌细胞功能中的作用及其机制 | 第32-50页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·细胞、载体、菌和 qPCR 引物 | 第32页 |
| ·实验主要试剂 | 第32-33页 |
| ·实验溶液配制 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-39页 |
| ·质粒提取 | 第33-34页 |
| ·细胞培养 | 第34页 |
| ·细胞转染 | 第34页 |
| ·PCR 检测 p53 mRNA 水平 | 第34-35页 |
| ·全长目的基因片段 p53 与 T 克隆载体连接、鉴定、测序 | 第35-38页 |
| ·细胞凋亡试验 | 第38页 |
| ·细胞周期实验 | 第38页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot) | 第38-39页 |
| ·实验结果 | 第39-47页 |
| ·肺癌细胞中 p53 的表达 | 第39-40页 |
| ·全长目的基因片段 p53 的测序 | 第40-41页 |
| ·重组 p53 过表达载体转染 A549 肺癌细胞 | 第41-42页 |
| ·qPCR 鉴定重组 p53 的过表达效率 | 第42页 |
| ·Western Blot 检测重组 p53 的过表达效果 | 第42-43页 |
| ·PAR1 参与凝血酶对 p53 的下调 | 第43页 |
| ·凝血酶对过表达 p53 肺癌细胞凋亡的影响 | 第43-45页 |
| ·凝血酶对过表达 p53 肺癌细胞周期的影响 | 第45-46页 |
| ·凝血酶对过表达 p53 肺癌细胞中 caspase-3、p21、p-Erk 的影响 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 | 第56-62页 |
| 硕士研究生期间发表的学术论文 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |