| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要英文缩写词 | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| ·肿瘤光动力疗法的研究 | 第11-14页 |
| ·光动力疗法的简介 | 第11-12页 |
| ·光敏剂的研究进展 | 第12-14页 |
| ·竹红菌素类光敏剂 | 第14页 |
| ·小结 | 第14页 |
| ·HPV18 与肿瘤关系及疫苗研究 | 第14-19页 |
| ·HPV18 的分子特点 | 第14-15页 |
| ·HPV18 相关的肿瘤 | 第15-16页 |
| ·HPV18 的致癌机制 | 第16-17页 |
| ·HPV18 相关的疫苗研究进展 | 第17-18页 |
| ·小结 | 第18-19页 |
| ·本课题的研究内容 | 第19页 |
| ·新型光动力治疗分子EDAHB对HeLa细胞的光毒性及机制 | 第19页 |
| ·基于HPV18E6E7 基因的宫颈癌治疗性疫苗的研制 | 第19页 |
| ·本课题研究技术路线 | 第19-23页 |
| ·新型光动力治疗分子EDAHB对HeLa细胞的光毒性及机制 | 第19-21页 |
| ·基于HPV18E6E7 基因的宫颈癌治疗性疫苗的研制 | 第21-23页 |
| 第2章 EDAHB 对 HeLa 细胞的光毒性及机制研究 | 第23-37页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·光敏剂及激光光源 | 第23页 |
| ·细胞株 | 第23-24页 |
| ·细胞培养的相关材料 | 第24页 |
| ·生化试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·光敏剂的细胞摄取及其在细胞内定位检测 | 第25页 |
| ·细胞的培养和光照 | 第25页 |
| ·细胞的生存曲线 | 第25-26页 |
| ·DNA梯带电泳 | 第26页 |
| ·凋亡细胞核的染色 | 第26页 |
| ·流式细胞仪测凋亡 | 第26-27页 |
| ·线粒体跨膜电位测定 | 第27页 |
| ·线粒体细胞色素c释放法的检测 | 第27页 |
| ·Caspase的活性测定 | 第27-28页 |
| ·实验结果 | 第28-34页 |
| ·EDAHB在细胞内的摄取与定位 | 第28-29页 |
| ·EDAHB的光毒性和暗毒性剂量 | 第29页 |
| ·凋亡细胞DNA的梯状条带 | 第29-31页 |
| ·PI核染色结果 | 第31页 |
| ·流式细胞仪检测的annexin V-FITC/PI染色结果 | 第31页 |
| ·线粒体跨膜电位测定结果 | 第31-33页 |
| ·线粒体细胞色素c释放检测结果 | 第33页 |
| ·Caspase的活性测定结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 第3章 HPV18 的E6E7 基因的优化、突变与表达 | 第37-65页 |
| ·实验材料 | 第37-40页 |
| ·细胞株 | 第37页 |
| ·细胞培养的相关材料 | 第37页 |
| ·质粒与菌株 | 第37页 |
| ·工具酶与试剂 | 第37-38页 |
| ·序列的设计合成与测序 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·试验中需要配制的溶液 | 第38-40页 |
| ·实验方法 | 第40-56页 |
| ·优化型HPV18E6E7 基因的设计和全基因合成 | 第40-42页 |
| ·通过重叠PCR的方法对HPV18 E6E7 基因特定位置进行定点突变 | 第42-50页 |
| ·构建pDC315-HPV18E6E7 重组表达载体 | 第50-53页 |
| ·构建pVR-HPV18E6E7 重组表达载体 | 第53-55页 |
| ·构建pcDNA3.1(+)-HPV18 E6E7 重组表达载体 | 第55页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-HPV18 E6E7 在真核细胞中的表达 | 第55-56页 |
| ·实验结果 | 第56-62页 |
| ·HPV18E6E7 优化基因的合成 | 第56-57页 |
| ·重叠PCR扩增结果 | 第57-58页 |
| ·pGEMT重组质粒阳性克隆酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组pDC315-HPV18 E6E7 质粒的双酶切鉴定 | 第59页 |
| ·重组pVR-HPV18 E6E7 质粒的双酶切鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组pcDNA3.1-HPV18E6E7 质粒的双酶切鉴定 | 第60页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1(+)-HPV18 E6E7 在真核细胞中的表达的结果 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
