| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-12页 |
| 第二章 材料与方法 | 第12-26页 |
| ·实验材料 | 第12-14页 |
| ·主要试剂 | 第12页 |
| ·主要仪器 | 第12-13页 |
| ·主要溶液配制 | 第13-14页 |
| ·实验动物及分组 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-26页 |
| ·sCTLA4-Ig序列的合成 | 第14-15页 |
| ·目的序列sCTLA4-Ig克隆至穿梭载体pYr-adshuttle-4 | 第15-17页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第17-18页 |
| ·通过LR体外同源重组将CTLA4-Ig表达框构建至pAd/PL-DEST腺病毒表达载体上 | 第18-19页 |
| ·CTLA4Ig腺病毒的包装及滴度测定 | 第19-21页 |
| ·BMSCs细胞复苏、传代 | 第21-22页 |
| ·病毒感染BMSCs细胞 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR检测各组细胞中CTLA4-Ig的mRNA水平 | 第23-24页 |
| ·细胞培养上清中CTLA4-Ig浓度的测定 | 第24页 |
| ·构建大鼠同种异体肢体移植模型 | 第24-25页 |
| ·各组移植肢体存活时间及出现排斥反应的时间 | 第25页 |
| ·移植肢体皮肤、肌肉HE染色病理检测并进行分级 | 第25页 |
| ·外周血中细胞因子IL-2的检测 | 第25页 |
| ·统计学分析 | 第25-26页 |
| 第三章 结果 | 第26-33页 |
| ·sCTLA4-Ig序列的合成 | 第26页 |
| ·目的序列sCTLA4-Ig克隆至pYr-adshuttle-4载体 | 第26-27页 |
| ·重组腺病毒质粒酶切鉴定 | 第27页 |
| ·PCR验证重组腺病毒的产生 | 第27-28页 |
| ·病毒感染BMSCs细胞效果 | 第28-30页 |
| ·RT-PCR检测各组细胞中CTLA4-Ig的mRNA水平 | 第30页 |
| ·ELLISA检测细胞培养上清中CTLA4-Ig指标表达水平 | 第30-31页 |
| ·受体鼠的一般情况 | 第31页 |
| ·各组移植肢体存活时间及出现排斥反应的时间 | 第31页 |
| ·移植肢体皮肤HE染色病理检测并进行分级 | 第31-32页 |
| ·外周血中细胞因子IL-2的检测 | 第32-33页 |
| 第四章 讨论 | 第33-37页 |
| ·CTLA4Ig转染BMSCs | 第33-34页 |
| ·CTLA4Ig与移植免疫耐受 | 第34页 |
| ·骨髓间质干细胞与免疫耐受 | 第34-35页 |
| ·基因转染骨髓间质干细胞诱导免疫耐受 | 第35-37页 |
| 第五章 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 综述 | 第43-56页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读硕士学位期间主要的研究成果 | 第57页 |
